芍药甘草附子汤对类风湿性关节炎大鼠的免疫调节作用(1)
摘 要：目的：探讨芍药甘草附子汤对类风湿性关节炎的作用机理。方法：48只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、雷公藤多甙组、芍药甘草附子汤组。除空白组外，各组大鼠复制类风湿关节炎模型，连续灌胃给药21天，采血测定白介素-1β(IL-1β)、前列腺素E2(PGE2)水平，取左踝关节组织观察病理改变。结果：芍药甘草附子汤组血清中IL-1β、PGE2明显降低，与模型组比较有显著性差异。关节病理损害明显改善。结论：芍药甘草附子汤能够降低IL-1β、PGE2含量从而减轻其对关节的侵害。
关键词：芍药甘草附子汤；类风湿性关节炎；IL-1β；PGE2
中图分类号：R285.5
文献标识码：A文章编号：
1673-7717(2008)05-1081-03
, 百拇医药
Immunoregulatory Effects of PGAD on Rheumatoid Arthritis rats
CHEN Rui,LIN Dayong,FU Yongqiang,advisor:GUAN Qingzeng,GU Song(
Liaoning University of TCM, Shenyang 110032,Liaoning,China)
Abstract：Objective: To investigate the mechanism of the therapy of Paeoniae and Glycyrrhizae and Aconiti Decoction(PGAD)on the rheumatoid arthritis. Methods: Forty-eight Wistar rats were divided into normal comparison group, model group, Tripterygium Wilfordii Hook.f group and PGAD group at random. Except the normal comparison group, the others were fabricated Adjuvant Arthritis(AA)model. After treated the model rats for 21 days. Collected the blood of all rats to measure the level of Interleukin-1β(IL-1β) and Prostaglandin E2(PGE2).And histopathology change of left malleolus joint were observed through light microscope. Results: PGAD can reduce the content of IL-1β and PGE2,And relive the histopathology change of malleolus joint, which were statistically significant compared to those of model group. Conclusion: PGAD can reduce the content of IL-1β and PGE2 to lessen their destroy of the joint.
, 百拇医药
Keywords：Paeoniae and Glycyrrhizae and Aconiti Decoction (PGAD);Rheumatic Arthritis; IL-1β；PGE2
芍药甘草附子汤出自《伤寒论》，见于68条“发汗，病不解，反恶寒者，虚故也，芍药甘草附子汤主之。”由白芍、炙甘草、炮附子3味药组成，其中芍药酸苦，养血敛阴，柔肝止痛；甘草甘温，补中缓急，止痛；二药相合酸甘化阴，滋阴养血，缓急止痛；附子大辛大热，补火助阳，散寒止痛，与甘草相合辛甘化阳，附子性猛，得甘草而缓，芍药性寒，得附子而和。且芍药可破阴结，祛除经络中之瘀，甘草补中坚筋骨，附子走而不守，通脉散寒。本方虽小，但用药精炼，用治痹证包含祛除病因，改善临床症状等功能。并且毒副作用较小，易长期坚持服用。为探讨该方的作用机理，以其对弗氏完全佐剂关节炎(AA)大鼠的免疫调节及关节病理形态的影响为主要研究内容进行实验观察。
1实验材料
, 百拇医药
1.1实验动物
普通级健康Wistar大鼠48只[辽宁中医药大学动物实验中心提供，许可证号：SYXY(辽)2003-0019]，雌雄各半，体重(180±20)g，随机分为4组，即空白对照组(A组)、模型组(B组)、雷公藤多甙对照组(C组)、芍药甘草附子汤组(D组)，每组各12只。
1.2药物
芍药甘草附子汤，由白芍、炙甘草、炮附子组成(药材由辽宁中医药大学附属医院中药房提供)，大鼠用量按文献方法折算。药物经常规煎煮、过滤、水浴蒸发至每毫升含生药材0.78g，置4℃冰箱保存备用。雷公藤多甙(江苏美通制药有限公司，国药准字：Z32021007，批号：070115)，大鼠用量按文献方法折算。用蒸馏水稀释至每毫升含原药物0.001g备用。
1.3试剂
, 百拇医药 白细胞介素-1β(ELISA)试剂盒(上海西唐生物科技有限公司) 。前列腺素E2(ELISA)试剂盒(北京北方伟业发展有限公司)。弗氏完全佐剂试剂盒(北京欣惠泽奥科技有限公司)。
1.4仪器
电热恒温水浴箱(HH.W21.Cr600,北京长安科学仪器厂)。飞鸽牌系列离心机(TDL-5-A)。
2实验方法
2.1模型复制
将大鼠适应性喂养1周，于B、C、D 3组大鼠每只右后足足垫常规消毒后皮内注射弗氏完全佐剂0.1mL，A组不造模。
2.2处理因素
造模第12天后，开始灌胃给药，每日1次。C组给予芍药甘草附子汤水煎液，按0.87mL/100g体重给药，A、B两组分别给予等量无菌生理盐水，D组给予雷公藤多甙水溶液，按1mL/100g体重给药。每周复查体重，及时调整药量。
, 百拇医药
2.3取材
于给药第21天后，用乌拉坦对大鼠进行腹腔麻醉，切开腹腔，用5mL注射器进行腹主动脉穿刺，抽取动脉血约3～5mL，离心后，取上清液待测。取左后足踝关节浸泡于福尔马林中固定备用。
2.4指标检测
2.4.1形态学指标 左后足踝关节上0.5cm处摘取肿胀足爪，常规固定，脱水，包埋，切片，HE染色，用光镜观察。
2.4.2理化指标 采用酶联免疫法测定其炎症介质IL-1β、 PGE2水平，按照试剂盒说明书操作。
2.5统计方法
实验数据以均数±标准差(±s)表示，统计学分析采用单因素方差分析及秩和检验。应用SPSS10.0统计软件进行处理。
3结 果
3.1芍药甘草附子汤对大鼠细胞因子的影响, 百拇医药(陈 蕊 林大勇 付勇强 关庆增 谷 松)
关键词：芍药甘草附子汤；类风湿性关节炎；IL-1β；PGE2
中图分类号：R285.5
文献标识码：A文章编号：
1673-7717(2008)05-1081-03
, 百拇医药
Immunoregulatory Effects of PGAD on Rheumatoid Arthritis rats
CHEN Rui,LIN Dayong,FU Yongqiang,advisor:GUAN Qingzeng,GU Song(
Liaoning University of TCM, Shenyang 110032,Liaoning,China)
Abstract：Objective: To investigate the mechanism of the therapy of Paeoniae and Glycyrrhizae and Aconiti Decoction(PGAD)on the rheumatoid arthritis. Methods: Forty-eight Wistar rats were divided into normal comparison group, model group, Tripterygium Wilfordii Hook.f group and PGAD group at random. Except the normal comparison group, the others were fabricated Adjuvant Arthritis(AA)model. After treated the model rats for 21 days. Collected the blood of all rats to measure the level of Interleukin-1β(IL-1β) and Prostaglandin E2(PGE2).And histopathology change of left malleolus joint were observed through light microscope. Results: PGAD can reduce the content of IL-1β and PGE2,And relive the histopathology change of malleolus joint, which were statistically significant compared to those of model group. Conclusion: PGAD can reduce the content of IL-1β and PGE2 to lessen their destroy of the joint.
, 百拇医药
Keywords：Paeoniae and Glycyrrhizae and Aconiti Decoction (PGAD);Rheumatic Arthritis; IL-1β；PGE2
芍药甘草附子汤出自《伤寒论》，见于68条“发汗，病不解，反恶寒者，虚故也，芍药甘草附子汤主之。”由白芍、炙甘草、炮附子3味药组成，其中芍药酸苦，养血敛阴，柔肝止痛；甘草甘温，补中缓急，止痛；二药相合酸甘化阴，滋阴养血，缓急止痛；附子大辛大热，补火助阳，散寒止痛，与甘草相合辛甘化阳，附子性猛，得甘草而缓，芍药性寒，得附子而和。且芍药可破阴结，祛除经络中之瘀，甘草补中坚筋骨，附子走而不守，通脉散寒。本方虽小，但用药精炼，用治痹证包含祛除病因，改善临床症状等功能。并且毒副作用较小，易长期坚持服用。为探讨该方的作用机理，以其对弗氏完全佐剂关节炎(AA)大鼠的免疫调节及关节病理形态的影响为主要研究内容进行实验观察。
1实验材料
, 百拇医药
1.1实验动物
普通级健康Wistar大鼠48只[辽宁中医药大学动物实验中心提供，许可证号：SYXY(辽)2003-0019]，雌雄各半，体重(180±20)g，随机分为4组，即空白对照组(A组)、模型组(B组)、雷公藤多甙对照组(C组)、芍药甘草附子汤组(D组)，每组各12只。
1.2药物
芍药甘草附子汤，由白芍、炙甘草、炮附子组成(药材由辽宁中医药大学附属医院中药房提供)，大鼠用量按文献方法折算。药物经常规煎煮、过滤、水浴蒸发至每毫升含生药材0.78g，置4℃冰箱保存备用。雷公藤多甙(江苏美通制药有限公司，国药准字：Z32021007，批号：070115)，大鼠用量按文献方法折算。用蒸馏水稀释至每毫升含原药物0.001g备用。
1.3试剂
, 百拇医药 白细胞介素-1β(ELISA)试剂盒(上海西唐生物科技有限公司) 。前列腺素E2(ELISA)试剂盒(北京北方伟业发展有限公司)。弗氏完全佐剂试剂盒(北京欣惠泽奥科技有限公司)。
1.4仪器
电热恒温水浴箱(HH.W21.Cr600,北京长安科学仪器厂)。飞鸽牌系列离心机(TDL-5-A)。
2实验方法
2.1模型复制
将大鼠适应性喂养1周，于B、C、D 3组大鼠每只右后足足垫常规消毒后皮内注射弗氏完全佐剂0.1mL，A组不造模。
2.2处理因素
造模第12天后，开始灌胃给药，每日1次。C组给予芍药甘草附子汤水煎液，按0.87mL/100g体重给药，A、B两组分别给予等量无菌生理盐水，D组给予雷公藤多甙水溶液，按1mL/100g体重给药。每周复查体重，及时调整药量。
, 百拇医药
2.3取材
于给药第21天后，用乌拉坦对大鼠进行腹腔麻醉，切开腹腔，用5mL注射器进行腹主动脉穿刺，抽取动脉血约3～5mL，离心后，取上清液待测。取左后足踝关节浸泡于福尔马林中固定备用。
2.4指标检测
2.4.1形态学指标 左后足踝关节上0.5cm处摘取肿胀足爪，常规固定，脱水，包埋，切片，HE染色，用光镜观察。
2.4.2理化指标 采用酶联免疫法测定其炎症介质IL-1β、 PGE2水平，按照试剂盒说明书操作。
2.5统计方法
实验数据以均数±标准差(±s)表示，统计学分析采用单因素方差分析及秩和检验。应用SPSS10.0统计软件进行处理。
3结 果
3.1芍药甘草附子汤对大鼠细胞因子的影响, 百拇医药(陈 蕊 林大勇 付勇强 关庆增 谷 松)