固精丹对小鼠免疫机能的影响(2)
耳肿胀度(mg)=左耳片重(mg)-右耳片重(mg)
2.6对免疫低下小鼠迟发型变态反应的影响[3]取18~22g小鼠,雌雄各半,随机分为6组,每组10只。给药组分别灌胃固精丹6、3、1.5g/kg,阳性对照组灌胃肾康宁3g/kg,连续给药9天;于给药第4天,除空白组外,各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺50mg/kg,连续3天;于同一天各组小鼠均于背部皮下注射7%DNCB丙酮液25μL致敏,于致敏后的第5天,末次给药后2h,在小鼠左耳的内外涂抹7%DNCB丙酮溶液25μL激发,24h后处死,剪下左右两耳重叠在一起,用8mm打孔器打下耳片称重,计算耳肿胀的程度。
2.7对正常小鼠IgM抗体产生的影响[4]取18~22g小鼠,雌雄各半,随机分为5组,每组10只,给药组分别灌胃固精丹6、3、1.5g/kg,阳性对照组灌胃肾康宁3g/kg,空白组灌胃等容量的蒸馏水,连续给药7天,于给药的第4天,各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞0.2mL/只致敏,于第7天再次腹腔注射5%鸡红细胞,第2次致敏的第5天,眶静脉采血,分离血清,取血清30μL,稀释600倍;取稀释后的血清0.6mL,加生理盐水0.6mL,5%鸡红细胞0.6mL,10%补体0.6mL,置于37℃恒温水浴中保温1h,取出后3000r/min离心10min,取上清液于540nm波长处测吸光度。
补体的制备:取豚鼠1只,心脏采血10mL,3000r/min离心15min,分离血清,与鸡红细胞压积10∶1的比例加入豚鼠血清,于4℃ 条件下,间歇性混匀10min,然后以2000r/min离心10min ......
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