同种异体骨髓间充质干细胞穴位移植1天与7天对急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的对比研究
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摘要：目的：进行兔骨髓间充质干细胞(MSC8)穴位移植1天与7天对梗死区心肌细胞凋亡的对比研究。方法：将已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔随机分为3组，包括模型组、穴位移植干细胞1天组、穴位移植干细胞7天组。用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死模型，将梗死后的兔分两组分别在1天与7天穴位注射相同数量的已经过分离、培养、扩增、标记后的MSCs悬液。采用脱氧核苷酸末端转移酶介导原位缺口标记(TUNEL法)确定细胞凋亡数，免疫组化SABC方法及RT-PCR和蛋白印迹法观察心肌细胞中Fas、FasL、Bcl-2蛋白及mRNA的表达。结果：(1)免疫组化示：梗死区凋亡细胞的表达，模型组高于正常组、穴位注射干细胞1天组和穴位注射干细胞7天组(P<0.05)，穴位注射干细胞7天组低于穴位注射干细胞1天组(但无统计学差异P>0.05)；Fas蛋白的表达，模型组高于正常组、穴位注射干细胞1天组和穴位注射干细胞7天组，穴位注射干细胞7天组低于穴位注射干细胞1天组(P<0.05)；FasL蛋白的表达，穴位注射干细胞1天组高于正常组、模型组、穴位注射干细胞7天组(P<0.05)；Bd-2蛋白的表达，模型组低于正常组、穴位注射干细胞1天组和穴位注射干细胞7天组(P<0.05)，穴位注射干细胞7天组高于穴位注射干细胞1天组(但无统计学差异P>0.05)。(2)RT-PCR与westem Blotting均显示：Fas、FasL、Bc1-2蛋白mRNA的表达穴位移植干细胞1天均高于穴位移植干细胞7天组。结论：(1)穴位移植骨髓间充质干细胞可使梗死及周围区心肌细胞凋亡数减少，其机制可能是通过Fas、FasL蛋白的减少、Bcl-2蛋白的增多来调节的。(2)穴位移植骨髓间充质干细胞7天较穴位移植骨髓间充质干细胞1天更能减少凋亡细胞的数量。
关键词：骨髓间充质干细胞；心肌梗死；细胞凋亡；TuNEL；Fas；FasL；Bcl-2；免疫组织化学；RT-PCR；蛋白印迹法：FasmRNA：FasLmRNA：Bcl-2mRNA
中图分类号：R-33 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2009)07-1364-05
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