大鼠乳腺癌癌前病变肝郁证造模的研究(2)
1材料与方法
1.1 实验动物
SPF级SD雌性大鼠50只,体重(200±20)g,山东大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(鲁)20030004。常规方法饲养1周,适应环境后开始实验。
1.2 实验试剂
二甲基苯蒽(Sigma公司生产,产品编号D3254-5G,087K1196),5g/支,溶于500mL芝麻油备用;苯甲酸雌二醇注射液(上海通用药业股份有限公司,批号040304),浓度2mg/支;黄体酮(浙江仙琚制药股份有限公司,批号040620),浓度10mg/支;血清5-羟色胺测定药盒(济南联兴生物科技有限公司);脱毛膏、甲醛,水合氯醛、乙醇、二甲苯、苏木素、伊红等。
1.3 实验仪器
OLYMPUS(BH-2)照像显微镜、光学显微镜、Leize切片机、精密游标卡尺、止血钳、恒温箱等。
1.4 动物分组及造模方法
(1)造模方法:
乳腺癌癌前病变的模型制造:参照宋爱莉等[4-5]方法,实验第1天用溶解有二甲基苯蒽(DMBA)的芝麻油,按1mL/100g比例给大鼠灌胃。
乳腺增生病的模型制造:参照饶金才等[6]方法,大鼠后腿内侧肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg•kg-1•d-1,连续25天,然后肌注黄体酮4mg•kg-1•d-1,连续5天,制造乳腺增生病动物模型。
肝郁证的模型制造:实验第4周开始,限制大鼠活动范围,用前头缠厚纱布的止血钳随机夹病证结合造模组大鼠的尾巴,使其保持激怒状态,尖叫、互相追咬,每天夹尾激惹45min,连续4周 ......
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