后发性白内障 (after cataract)是白内障术后的主要并发症。因术后残留的LEC发生增殖、移行,使晶状体后囊膜发生混浊导致视力再度下降。本文拟探讨Ele 对U-II诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)增殖的影响及其细胞信号转导机制,为寻求防治后发性白内障的有效药物提供科学依据。

    1材料

    1.1细胞将冻存于液氮内的永生性人晶状体上皮细胞系B-3(humen lens epithelial cell B-3,HLEB-3)进行复苏,置37 ℃、5%的CO₂培养箱中培养,取对数生长期的细胞制成悬液并调整细胞密度为1×105 个/mL,用传代培养的细胞进行以下实验。

    1.2 试剂榄香烯(elemene,Ele)为大连金港制药有限公司产品,人尾加压素II(human urotensin II,hU-II)为美国Phoenix公司产品,DMEM培养基(dulbecco,s modified eagle,s medium)和胰蛋白酶(trypsin)为美国GIBCO公司产品,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)、牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、乙二醇-双四乙酸(Ethylene glycol-bis tetraacetic acid,EGTA)和Triton X-100为美国Amresco公司产品,乙二胺四乙酸(ethylenediaminotetraacteic acid,EDTA)为美国Augus公司产品,Fura-2/AM为美国Sigma公司产品,新生牛血清(newborn calf serum,NCS)为奥地利PAA公司产品,小鼠抗大鼠增殖细胞核抗原单克隆抗体和FITC标记山羊抗小鼠IgG购自北京中山生物技术有限公司,I125 cAMP和I125 cGMP放免试剂盒来自上海中医药大学同位素室 ......