养血消风饮对小鼠接触性皮炎的作用及超微结构影响的实验研究(2)
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中药治疗组每日灌胃剂量为0.4mL,西药组对照组灌服氯雷他啶(商品名:开瑞坦,国药准字H10970410,上海先灵葆雅制药有限公司生产),用生理盐水溶解制成混浊液,按成人4倍等效剂量灌胃,每次给药0.104mg/0.4mL(即给药剂量为0.0052g/kg)。空白组、模型组给予生理盐水灌胃。以上各组小鼠均调整日灌胃剂量为0.4mL,每日给药1次。灌药自致敏前1天开始,每天1次,再于激发前2h及激发后6h灌药1次。
1.3.3 造模及给药方法
激发24h后处死全部小鼠,立即剪下小鼠左右耳廓备检。激发后24h将动物颈椎离断处死,耳廓造模鼠立即剪下双侧耳廓备检。使用0.6cm的金属耳肿打孔器在左右耳中部打孔,取相同大小的耳组织,使用电子天平称重,计算左右耳重量差。再以小鼠左、右耳片重量差值(mg)作为鼠耳ACD反应的强度,并计算肿胀抑制百分率;同时完整摘取小鼠脾及胸腺,用电子天平测定其重量,分别以每10g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作为脾指数和胸腺指数。
小鼠耳廓肿胀抑制百分率计算公式如下:
肿胀抑制百分率(%)=ACD模型组肿胀mg数-给药组耳肿胀mg数对照组耳肿胀mg数
背部造模鼠处死后将背部激发区皮肤全层剪下,在置于冰块上的平皿上切成1mm3小块3~4块,立即投入磷酸缓冲液(PBS)配置的2.5%戊二醛中前固定2h以上;PBS漂洗液漂洗后,1%锇酸后固定1h;乙醇、丙酮梯度脱水,环氧树脂Epon812浸透过夜,包埋,40℃、60℃各20h常规聚合,LKB-V超薄切片机切片,厚度约500~600,醋酸铀、柠檬酸铅双染色,JEM-100CXII型透射电镜下观察并拍片 ......
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