人参五灵脂配伍对人参补气作用影响的初步药效学研究(2)
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人参∶五灵脂1∶1:分析天平称取生晒参饮片25g、五灵脂25g,分次加蒸馏水500mL、400mL,方法同上。
人参∶五灵脂1∶2:分析天平称取生晒参饮片25g、五灵脂50g,分次加蒸馏水375mL、300mL,方法同上。
2.2分组给药
ICR小鼠300只,随机分为空白对照组、人参单煎组、五灵脂单煎组、人参与五灵脂混煎组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(人参∶五灵脂1∶1、1∶2、2∶1),每组50只。人参组、五灵脂组均灌胃给予生药1.3g/ (kg•d),混煎组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别灌胃给予生药2.6 g/ (kg•d)、3.9 g/ (kg•d)、1.95 g/ (kg•d),空白组灌胃给予蒸馏水,灌胃体积为0.2mL/10g,每天2次,连续7天。
2.3人参 五灵脂配伍对小鼠应激反应的影响
2.3.1对小鼠游泳时间的影响 末次给药后30min,分别取各组小鼠10只,在各组小鼠尾部束一个体重10%的重物,将小鼠分别放入玻璃缸内游泳,并计时。当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为体力耗竭,记录小鼠的游泳时间。
2.3.2 对小鼠耐常压缺氧作用的影响 末次给药后30min,各组分别取10只小鼠,放入盛有10g钠石灰的广口瓶内(每瓶放1只小鼠)。以呼吸停止为指标,观察小鼠死亡的时间,各组之间进行统计学比较。
2.3.3对小鼠耐寒作用的影响 末次给药后30min,各组分别取10只小鼠,将小鼠放入(-5±1)℃的冰箱内。2h后将小鼠取出,分别统计各组小鼠存活数,计算各组小鼠存活百分率,各组之间进行统计学比较。
2.4对小鼠胸腺指数和脾指数的影响
末次给药后30min,各组分别取10只小鼠,称体重,处死小鼠后迅速取出胸腺及脾脏并称重,计算胸腺、脾脏指数。
2.5对小鼠肝糖元含量的影响
末次给药后30min,各组分别取10只小鼠,除空白组外,每组动物按0.2mL/10g给予20g/dL葡萄糖溶液灌胃。2h后处死动物,取适量肝脏用生理盐水漂洗后,滤纸吸干,分析天平精确称取75mg置于试管中,加入碱液225μL,沸水浴20min,流水冷却,加入蒸馏水7.2mL,制成1%肝糖元检测液,加入显色液2mL,混匀后置沸水中煮5min并冷却。空白对照管中加入1mL蒸馏水、显色液2mL,混匀后置沸水中煮5min并冷却。标准管加入0001mg/mL标准液1mL、显色液2mL,混匀后置沸水中煮5min,流水冷却。分光光度计在620nm波长下空白管调零,绘成标准曲线,得出回归方程。并根据各管的OD值计算样品中的肝糖元含量。
2.6统计方法
数据结果以±s表示,应用SPSS 16.0软件进行单因素方差(one-way ANOVA)分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
3 实验结果
3.1人参 五灵脂配伍对小鼠应激反应的影响
3.1.1对小鼠游泳时间的影响 对各组小鼠游泳时间进行比较,发现混煎组Ⅲ小鼠游泳时间最长,混煎组Ⅰ次之,五灵脂组及空白组游泳时间均较短。其中,游泳时间最长的混煎组Ⅲ与人参组、混煎组Ⅱ比较有明显差异(P<005),与五灵脂组、空白组比较差异显著(P<0.001);混煎组Ⅰ小鼠游泳时间仅次于混煎组Ⅲ,且与空白组及五灵脂组比较差异显著(P<0.001)。见表1。
表1人参五灵脂配伍对小鼠游泳时间的影响(±s)
分组n游泳时间(min)
空白对照组10255.8±54.14
人参单煎组10315.3±46.13*△
五灵脂单煎组10269.4±37.05△△
混煎组Ⅰ(人参∶五灵脂=1∶1)10347.2±47.91**☆
混煎组Ⅱ(人参∶五灵脂=1∶2)10311.8±70.2△
混煎组Ⅲ(人参∶五灵脂=2∶1)10381.6±106.6**
注:与空白组比较,*P<0.05,**P<0.001;与五灵脂组比较,☆P<0.001;与混煎组Ⅲ比较,△P<0.05,△△P<0.001。
3.1.2 对小鼠耐常压缺氧作用的影响
对各组小鼠耐缺氧时间进行比较,发现混煎组Ⅲ小鼠耐缺氧时间最长,人参组次之,五灵脂组及空白组耐缺氧均较短。其中,耐缺氧时间最长的混煎组Ⅲ与人参组比较有明显差异(P<0.05),与混煎组Ⅰ、混煎组Ⅱ比较差异显著(P<0.001);人参组耐缺氧时间与混煎组Ⅰ、混煎组Ⅱ比较差异显著(P<0.001);混煎组Ⅰ与混煎组Ⅱ比较无差异性,但与五灵脂组比较均有明显差异(P<0.05)。见表2。
表2人参 五灵脂配伍对小鼠耐缺氧时间的影响(±s)
分组n耐缺氧时间(min)
空白对照组10753.2±191.3☆☆△△
人参单煎组101324.0±87.96**△
五灵脂单煎组10783.8±56.4☆☆△△
混煎组Ⅰ(人参∶五灵脂=1∶1)101028.0±79.97*☆☆△△◇
混煎组Ⅱ(人参∶五灵脂=1∶2)101004.0±101.1*☆☆△△◇
混煎组Ⅲ(人参∶五灵脂=2∶1)101577.0±325.7**☆
注:与空白组比较,*P<0.05,**P<0.001;与人参组比较,☆P<0.05,☆☆P<0.001;与混煎组Ⅲ比较,△P<0.05,△△P<0.001;与五灵脂组比较,◇P<0.05。
3.1.3对小鼠耐寒作用的影响
对各组小鼠耐寒作用的存活率进行比较,发现混煎组Ⅲ小鼠存活率最高,人参组、混煎组Ⅰ、混煎组Ⅱ、五灵脂组次之,空白组存活率最低。见表3。
表3人参五灵脂配伍对小鼠存活率的影响
分组n死亡数量存活率(%)
空白对照组10820
人参单煎组10460
五灵脂单煎组10460
混煎组Ⅰ(人参∶五灵脂=1∶1)10460
混煎组Ⅱ(人参∶五灵脂=1∶2)10460 ......
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