应用双向凝胶电泳分析掌叶半夏总蛋白对人卵巢癌SKOV3细胞蛋白质表达谱的影响(3)
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蛋白质组学(proteomics)是由澳大利亚科学家Marc Wilkins 和Keith Williams 于1994 年提出的,即指某一物种、个体、器官、组织、细胞乃至体液在精确控制其环境条件之下,特定时刻的全部蛋白质表达图谱。由于蛋白质是作为生物体生命活动的执行者和体现者,所以从整体角度、全景式地研究不同时期、不同条件下细胞内发生的蛋白质变化具有重要的理论和应用价值。双相凝胶电泳技术(two dimensional sodium dodecyl sulphate polyacry lamide gel electrophoresis 2D-PAGE)是蛋白质组学研究中最为常用蛋白质分离技术[6],能将数千种蛋白质同时进行分离与展示。中药成分复杂,因此,通过蛋白组学技术和策略,以蛋白质为靶点,分析用药前后所表达的蛋白质组的差异,鉴定其中发生相应变化的蛋白质,有可能对中药的作用机制取得突破性进展[7-8]。笔者的前期实验发现掌叶半夏总蛋白对体外培养的卵巢癌细胞SKOV3的生长有明显的抑制及促凋亡作用。本实验在掌叶半夏总蛋白处理组与对照组共发现550个差异蛋白质点,重复性好,实验结果满意,并初步估算了其等电点及分子量。下一步笔者将应用质谱分析和蛋白质序列数据库检索等方法对差异蛋白质进行鉴定,可望从蛋白质水平揭示掌叶半夏总蛋白抗卵巢癌机制,为寻找一种能有效防治卵巢癌的纯中药制剂提供实验依据。
本研究采用蛋白质组学技术在不预设指标情况下,对参与治疗作用的所有药物成分进行分析,适合于中医药治疗的多靶点、多途径、多成分特点,为中医药研究开辟了一条新的途径。通过蛋白质组学技术提供有效的药物靶蛋白,研究其作用机制,对这一传统中药的开发使用具有重要意义。
参考文献
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[2] 朱铭伟,周抗美,丁声颂. 掌叶半夏总蛋白对卵巢癌细胞株及人脐血造血细胞的作用[J]. 上海医科大学学报, 1999,26(6):455-458.
[3] 辛普森,理查德 J.蛋白质与蛋白质组学实验指南[M].北京:化学工业出版社 , 2006: 131-145.
[4] 郭尧君.蛋白质电泳实验技术[M].北京:科学出版社 , 1999: 141-142.
[5] 朱黎,范汉东,王雪. 掌叶半夏凝集素的分离纯化及其在体内外对小鼠肉瘤S180细胞的影响2009[J]. 武汉大学学报(医学版), 2009,30(1):10-15 ......
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