软坚消瘿汤治疗实验性自身免疫性甲状腺炎疗效机制研究(2)
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参见附件。
1.5.2细胞因子及抗体
各组实验大鼠于治疗后第42天腹主动脉取血,离心1500r/min获取血清,采用ELISA检测TGAb,TPOAb,IL-1、4、6及TNF-α。
1.6 统计方法
采用SPSS 13.0统计软件数据分析,数据满足正态性和方差齐性,组间采用方差分析,所列数据采用±s表示。
2 结 果
2.1 甲状腺病理形态学
见图1。正常组:图1A,TEC排列整齐,滤泡呈圆形或椭圆形,大小均匀一致,含胶质丰富,染色淡红色,未见淋巴细胞及浆细胞浸润;模型组:图1B,甲状腺滤泡大量破坏,未破坏者萎缩呈扁平状,大小不一,含胶质较少,染色淡红色,滤泡周围见显著淋巴细胞浸润,滤泡内见浆细胞浸润。雷公藤组:图1C,滤泡内及TEC间有部分淋巴细胞及浆细胞,滤泡形态基本规则,被破坏者少,胶质含量少。软坚消瘿汤组:图1D,滤泡呈低柱状,滤泡形态基本规则,TEC间偶见淋巴细胞浸润,滤泡内未见浆细胞,胶质含量略少,说明中药使甲状腺病理损伤得以修复但未恢复正常水平。
A
B
C
D
图1 甲状腺病理形态(×400)
2.2 各组大鼠血清抗体(±s)比较
见表1。
表1 各组大鼠血清抗体比较
组别nTPOAbTGAb
模型组103.13±0.66384.05±81.82
雷公藤组102.02±0.55#327.22±63.17▼
中药组101.67±0.34#★ 273.20±42.73#★
正常组101.49±0.40#146.56±39.39#
注:与模型组比较,#P<0.01,▼P<0.05;与雷公藤组比较,★P<0.05。
模型组与正常组比较双抗体明显升高(P<0.01),模型组与两治疗组比较TPOAb有明显差异(P<0.01);治疗组间比较有统计学差异(P<0.05)。说明两治疗组均可以明显降低TPOAb,但中药组优于雷公藤组。
模型组与两治疗组比较TGAb有统计学差异,雷公藤组(P<0.05),中药组(P<0.01);治疗组间比较有统计差异(P<0.05)。说明二者均降低TGAb但中药组优于雷公藤组。
2.3 各组大鼠血清IL-1 4(±s)比较
见表2。
表2 各组大鼠血清IL-1 4比较
组别nIL-1IL-4
模型组10263.21±62.10470.97±89.78
雷公藤组10193.03±55.58#387.65±97.64▼
中药组10136.69±55.99#★297.62±87.56#★
正常组10117.22±35.69#209.04±37.28#
注:与模型组比较,#P<0.01,▼P<0.05;与雷公藤组比较,★P<0.05。
模型组与正常组比较IL-1、4明显升高(P<0.01),模型组与两治疗组比较IL-1有明显差异(P<0.01);治疗组间比较有统计意义(P<0.05)。说明二者均降低IL-1但中药优于雷公藤。
模型组与两治疗组比较IL-4有统计学意义,雷公藤组(P<0.05),中药组(P<0.01);治疗组间比较有统计差异(P<0.05)。说明二者均可降低IL-4,但中药优于雷公藤。
2.4 各组大鼠血清IL-6 TNF-α含量(±s)比较
见表3。
表3 各组大鼠血清IL-6 TNF-α含量比较
组别nIL-6TNF-α
模型组10107.02±21.8258.76±10.76
雷公藤组1090.61±15.07▼51.26±6.05▼
中药组1061.95±13.48#◆49.52±8.02▼▲
正常组1054.29±15.03#45.44±7.35#
注:与模型组比较,#P<0.01,▼P<0.05;与雷公藤组比较,◆P<0.01,▲P>0.05。
模型组与正常组比较血清IL-6、TNF-α明显升高(P<0.01)。
模型组与两治疗组比较IL-6有统计学意义,雷公藤组(P<0.05),中药组(P<0.01);治疗组间比较有明显差异(P<0.01)。说明二者均降低IL-6,但中药优于雷公藤。
模型组与两治疗组比较TNF-α有统计意义均(P<0.05);治疗组间比较差异不明显(P>0.05)。说明治疗组可降低TNF-α水平。
3 讨论
3.1 TPOAb TGAb与EAT
大量临床和实验研究表明,高TPOAb、TGAb是桥本病诊断和预测预后的主要指标,降低抗体在血清中的水平在控制本病向甲减发展中有重要意义。高水平的TPOAb可与NK细胞作用对TEC产生直接杀伤作用,另外TPOAb在TEC基底膜补体复合物的固定和激活过程中起主要介导作用,在反应过程中甲状腺功能受到破坏。TGAb在抗体依赖性细胞毒中起重要介导作用,其可与TG结合致使甲状腺素释放减少,因此降低双抗体水平在治疗桥本病中成为基本措施。实验结果显示,模型组较正常对照组抗体水平明显升高,故从抗体水平观察模型建立符合实验标准。软坚消瘿汤组疗后抗体显著降低,基本接近正常。本实验数据显示软坚消瘿汤及雷公藤均可降低血清中双抗体水平,但中药疗效明显优于雷公藤,由此推测软坚消瘿汤在治疗桥本病的机理中,可能与降低TPOAb、TGAb水平有关。
3.2 血清IL-1 4 6及TNF-α与EAT
本病发病过程中细胞免疫起重要作用,甲状腺细胞和淋巴细胞释放大量细胞因子使本病进一步恶化。TEC细胞代谢损伤后释放高水平的IL-1、6[3],,且IL-1可以上调凋亡相关蛋白水平,研究认为IL- 6 可以作为甲状腺细胞损害的指标[4],故此两种细胞因子血清中水平高低与病情的控制密切相关。IL-1、6、TNF-α可以促进单核细胞及T细胞进入甲状腺组织,且IL-1及TNF-α可加强TEC与T细胞的结合,并同其他细胞因子共同构成复杂细胞因子网络[5]。IL-6升高使得B细胞产生抗体数量增加,IL-4、6高水平存在促使B细胞向浆细胞分化,从而导致甲状腺滤泡上皮细胞的破坏 ......
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