中药联合干细胞蛛网膜下腔移植对缺血再灌注大鼠脑脊液NGF的影响(3)
参见附件(12kb)。
3 讨 论
脑血管病(cerebrovascular disease，CVD)以高发病率、高致残率、高死亡率成为严重威胁人类健康的重大疾病[5]。应用BMSC和BMNC治疗缺血性脑卒中是近年来医学研究的热点。中药复方与BMSC、BMNC联合治疗CVD的研究报道较少，尤其应用蛛网膜下腔注射方式移植的实验研究国内罕见报道。我们应用中药与蛛网膜下腔移植同种异体BMSC和BMNC到卒中大鼠脑内,进行了脑脊液中NGF因子含量的定量研究，进而尝试一种新的移植方式和移植效率的检测手段，比较BMSC和BMNC，以及中药与BMSC、BMNC联合移植对卒中大鼠脑脊液内NGF含量的影响。
3.1 细胞移植的途径
经蛛网膜下腔移植是一种较安全、有效的细胞移植方式。移植细胞没有血脑屏障阻碍，直接进入脑脊液，归巢到脑实质病变靶部位，广泛地参加脑卒中后组织代谢、替代与修复。移植创伤、手术难度和风险较脑立体定位移植低，移植剂量和细胞数量较立体定位大，分布较广泛，因无血脑屏障阻碍进入脑内的有效细胞数量较经血管移植多，费用较低。但是大鼠动物实验中移植难度较大，应严格掌握进针角度、剂量、速度与移植时机，防止动物颅内高压死亡。此种细胞移植方式国内外尚无大规模临床试验报道，实验研究也罕见报道。
3.2 BMSC和BMNC治疗脑血管病的机制及其对颅内NGF的影响
BMSC是骨髓内非造血组织干细胞，尚未发现特异性抗原标记，在体内外可向骨、肌肉、肝脏、上皮、神经等多胚层分化[1-3]。BMNC是由骨髓提取的干/祖细胞混合群,含有如内皮祖细胞、造血干细胞、间充质干细胞、造血内皮母细胞等。由于其中细胞种类较多，移植后可多向分化。两种细胞通过神经组织再生、分泌NTF、促进血管新生、刺激内源性神经干细胞增值分化、抗凋亡、免疫调节等机制全面修复病变组织，治疗脑血管病，成为临床治疗和研究缺血性血管病的热点。
NGF是NTF中最早被发现的，广泛分布于中枢神经系统。NGF具有神经营养、神经保护和促神经生长的生物学效应，对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用。本实验结果显示，脑缺血再灌注损伤后期大鼠脑组织NGF水平有所升高，体现大鼠对缺血再灌注神经损伤的自我修复能力，但早期修复能力有限。通过BMNC/BMSC移植可弥补这种早期缺陷，在治疗4天时就可使CSF内NGF水平显著增高，并持续28天以上，两种细胞在早期和后期的对NSF的上调作用均未见明显差异。
3.3 细胞移植效率的检测
不同脑组织的代谢产物都可进入脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF),CSF中NTF的特异性改变,可以间接、动态反映脑的代谢状态和内环境稳定性。本实验即采用检测CSF中NGF水平的方法间接反映干细胞在颅内存在、存在的生物学状态。CSF中敏感NTF含量的检测在细胞移植效率检测、在细胞活性和功能监测等方面可能具有一定意义。
3.4 中药与干细胞移植联合应用的意义
中药对干细胞的影响研究多集中于单味药或提取物对干细胞体外诱导分化的影响，中药复方联合干细胞移植对脑内细胞因子代谢方面的研究少见 ......
3 讨 论
脑血管病(cerebrovascular disease，CVD)以高发病率、高致残率、高死亡率成为严重威胁人类健康的重大疾病[5]。应用BMSC和BMNC治疗缺血性脑卒中是近年来医学研究的热点。中药复方与BMSC、BMNC联合治疗CVD的研究报道较少，尤其应用蛛网膜下腔注射方式移植的实验研究国内罕见报道。我们应用中药与蛛网膜下腔移植同种异体BMSC和BMNC到卒中大鼠脑内,进行了脑脊液中NGF因子含量的定量研究，进而尝试一种新的移植方式和移植效率的检测手段，比较BMSC和BMNC，以及中药与BMSC、BMNC联合移植对卒中大鼠脑脊液内NGF含量的影响。
3.1 细胞移植的途径
经蛛网膜下腔移植是一种较安全、有效的细胞移植方式。移植细胞没有血脑屏障阻碍，直接进入脑脊液，归巢到脑实质病变靶部位，广泛地参加脑卒中后组织代谢、替代与修复。移植创伤、手术难度和风险较脑立体定位移植低，移植剂量和细胞数量较立体定位大，分布较广泛，因无血脑屏障阻碍进入脑内的有效细胞数量较经血管移植多，费用较低。但是大鼠动物实验中移植难度较大，应严格掌握进针角度、剂量、速度与移植时机，防止动物颅内高压死亡。此种细胞移植方式国内外尚无大规模临床试验报道，实验研究也罕见报道。
3.2 BMSC和BMNC治疗脑血管病的机制及其对颅内NGF的影响
BMSC是骨髓内非造血组织干细胞，尚未发现特异性抗原标记，在体内外可向骨、肌肉、肝脏、上皮、神经等多胚层分化[1-3]。BMNC是由骨髓提取的干/祖细胞混合群,含有如内皮祖细胞、造血干细胞、间充质干细胞、造血内皮母细胞等。由于其中细胞种类较多，移植后可多向分化。两种细胞通过神经组织再生、分泌NTF、促进血管新生、刺激内源性神经干细胞增值分化、抗凋亡、免疫调节等机制全面修复病变组织，治疗脑血管病，成为临床治疗和研究缺血性血管病的热点。
NGF是NTF中最早被发现的，广泛分布于中枢神经系统。NGF具有神经营养、神经保护和促神经生长的生物学效应，对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用。本实验结果显示，脑缺血再灌注损伤后期大鼠脑组织NGF水平有所升高，体现大鼠对缺血再灌注神经损伤的自我修复能力，但早期修复能力有限。通过BMNC/BMSC移植可弥补这种早期缺陷，在治疗4天时就可使CSF内NGF水平显著增高，并持续28天以上，两种细胞在早期和后期的对NSF的上调作用均未见明显差异。
3.3 细胞移植效率的检测
不同脑组织的代谢产物都可进入脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF),CSF中NTF的特异性改变,可以间接、动态反映脑的代谢状态和内环境稳定性。本实验即采用检测CSF中NGF水平的方法间接反映干细胞在颅内存在、存在的生物学状态。CSF中敏感NTF含量的检测在细胞移植效率检测、在细胞活性和功能监测等方面可能具有一定意义。
3.4 中药与干细胞移植联合应用的意义
中药对干细胞的影响研究多集中于单味药或提取物对干细胞体外诱导分化的影响，中药复方联合干细胞移植对脑内细胞因子代谢方面的研究少见 ......
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