穴位埋线治疗大鼠非酒精性脂肪肝的实验研究(1)
参见附件(12kb)。
(浙江省中医院，浙江 杭州 310006)
摘 要：目的：观察穴位埋线对非酒精性脂肪肝的治疗作用。方法：采用高脂饮食喂养12周建立非酒精性脂肪肝大鼠模型后以中脘、气海、天枢(双)穴位埋线治疗8周，常规HE染色检测肝组织的脂肪变和炎症程度，生化法检测血清和肝组织甘油三酯、胆固醇及血清ALT、AST的变化，ELISA法检测血清TNF-α含量。结果：模型组大鼠肝组织可见弥漫性肝细胞脂肪变和不同程度炎细胞浸润，血清及肝组织脂质代谢紊乱，血清ALT、AST水平及TNF-α水平较正常组明显升高，应用穴位埋线治疗后，大鼠肝组织脂肪变和炎症程度明显减轻，肝组织TG、CHOL含量明显下降，血清ALT、AST水平及TNF-α含量明显降低。结论: 穴位埋线对非酒精性脂肪肝有较好的治疗作用，其作用机制可能与其调节脂质代谢、降低血清TNF-α水平有关。
关键词：非酒精性脂肪肝；穴位埋线；中脘；气海；天枢
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717(2011)03-0543-02
收稿日期：2010-10-09
基金项目：浙江省中医药科技计划资助项目(2007CB146)
作者简介：龚秀杭(1957-)，女，浙江杭州人，副主任中医师，研究方向：针刺疗法治疗消化系统疾病、妇科疾病。
近年来，随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，非酒精性脂肪肝的发病率不断上升，发病年龄趋于低龄化，并且部分患者可进展到终末期肝病，因而已成为人们普遍关注的一个公共健康问题。本实验选择经济方便的穴位埋线作为治疗手段，观察其对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝的影响，为临床防治提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD大鼠24只，雄性，清洁级，体重190～210g，由上海西普尔——必凯实验动物中心提供。
1.2 主要试剂 胆固醇(批号061108)为上海伯奥生物科技有限公司，3号胆盐(批号20061206)为杭州微生物试剂有限公司产品， ALT(批号6653/31033/6)、AST(批号6730/31595/1)、TG(批号571/019/1)、CHOL(批号130/017/1)、HDL(批号6660/31043/1)为上海申能-德赛诊断技术有限公司产品，HDL(批号0060428-2)为上海复星长征医学科学有限公司，TNF-αELISA试剂盒(批号QRCT300333)为美国ADL公司产品。
1.3 NASH模型的建立 大鼠每天予以高脂饲料(82%普通标准饲料+10%猪油+2%胆固醇+1%胆盐+5%蛋黄粉)喂养，连续12周建立非酒精性脂肪性肝病模型大鼠。
1.4 分组及处理 24只大鼠随机分为正常组、模型组及穴位埋线组，每组8只，正常组每天予普通饲料喂养20周；模型组前12周每天给予高脂饲料喂养，后8周改这普通饲料喂养；穴位埋线组前12周每天给予高脂饲料喂养，后8周改为普通饲料喂养，同时从第13周第1天起采用穴位埋线方法进行治疗，穴位选用中脘、气海、天枢(双)[1]，用消毒镊子将0.5cm生物可降线置于一次性埋线器具[京药监械(准)字2005第2270643号]套管内，消毒皮肤，快速刺入特定穴位皮下，14天后重复，共4次，疗程8周。实验第20周未禁食不禁水16h，次日空腹取血及肝组织进行下列检测。
1.5 检测指标 肝组织病理学检查：常规HE染色，光镜下观察肝脏细胞脂肪变性及炎症浸润程度，非酒精性脂肪性肝病的病理组织学诊断参考2006年2月中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组修订的“非酒精性脂肪性肝病诊疗指南”[5]，其中脂肪变程度分4度：F0(-)、F1(+)、F2(2+)、F3(3+)、F4(4+)；炎症程度分为3级：G0(-)、G1(+)、G2(2+)、G3(3+)。血清ALT、AST、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C采用全自动生化仪检测；肝组织匀浆TG采用异丙醇提取、氧化铝吸附磷脂和乙酰丙酮显色法测定，CHOL采用异丙醇提取，高铁、硫酸显色法测定 ......
(浙江省中医院，浙江 杭州 310006)
摘 要：目的：观察穴位埋线对非酒精性脂肪肝的治疗作用。方法：采用高脂饮食喂养12周建立非酒精性脂肪肝大鼠模型后以中脘、气海、天枢(双)穴位埋线治疗8周，常规HE染色检测肝组织的脂肪变和炎症程度，生化法检测血清和肝组织甘油三酯、胆固醇及血清ALT、AST的变化，ELISA法检测血清TNF-α含量。结果：模型组大鼠肝组织可见弥漫性肝细胞脂肪变和不同程度炎细胞浸润，血清及肝组织脂质代谢紊乱，血清ALT、AST水平及TNF-α水平较正常组明显升高，应用穴位埋线治疗后，大鼠肝组织脂肪变和炎症程度明显减轻，肝组织TG、CHOL含量明显下降，血清ALT、AST水平及TNF-α含量明显降低。结论: 穴位埋线对非酒精性脂肪肝有较好的治疗作用，其作用机制可能与其调节脂质代谢、降低血清TNF-α水平有关。
关键词：非酒精性脂肪肝；穴位埋线；中脘；气海；天枢
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717(2011)03-0543-02
收稿日期：2010-10-09
基金项目：浙江省中医药科技计划资助项目(2007CB146)
作者简介：龚秀杭(1957-)，女，浙江杭州人，副主任中医师，研究方向：针刺疗法治疗消化系统疾病、妇科疾病。
近年来，随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，非酒精性脂肪肝的发病率不断上升，发病年龄趋于低龄化，并且部分患者可进展到终末期肝病，因而已成为人们普遍关注的一个公共健康问题。本实验选择经济方便的穴位埋线作为治疗手段，观察其对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝的影响，为临床防治提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD大鼠24只，雄性，清洁级，体重190～210g，由上海西普尔——必凯实验动物中心提供。
1.2 主要试剂 胆固醇(批号061108)为上海伯奥生物科技有限公司，3号胆盐(批号20061206)为杭州微生物试剂有限公司产品， ALT(批号6653/31033/6)、AST(批号6730/31595/1)、TG(批号571/019/1)、CHOL(批号130/017/1)、HDL(批号6660/31043/1)为上海申能-德赛诊断技术有限公司产品，HDL(批号0060428-2)为上海复星长征医学科学有限公司，TNF-αELISA试剂盒(批号QRCT300333)为美国ADL公司产品。
1.3 NASH模型的建立 大鼠每天予以高脂饲料(82%普通标准饲料+10%猪油+2%胆固醇+1%胆盐+5%蛋黄粉)喂养，连续12周建立非酒精性脂肪性肝病模型大鼠。
1.4 分组及处理 24只大鼠随机分为正常组、模型组及穴位埋线组，每组8只，正常组每天予普通饲料喂养20周；模型组前12周每天给予高脂饲料喂养，后8周改这普通饲料喂养；穴位埋线组前12周每天给予高脂饲料喂养，后8周改为普通饲料喂养，同时从第13周第1天起采用穴位埋线方法进行治疗，穴位选用中脘、气海、天枢(双)[1]，用消毒镊子将0.5cm生物可降线置于一次性埋线器具[京药监械(准)字2005第2270643号]套管内，消毒皮肤，快速刺入特定穴位皮下，14天后重复，共4次，疗程8周。实验第20周未禁食不禁水16h，次日空腹取血及肝组织进行下列检测。
1.5 检测指标 肝组织病理学检查：常规HE染色，光镜下观察肝脏细胞脂肪变性及炎症浸润程度，非酒精性脂肪性肝病的病理组织学诊断参考2006年2月中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组修订的“非酒精性脂肪性肝病诊疗指南”[5]，其中脂肪变程度分4度：F0(-)、F1(+)、F2(2+)、F3(3+)、F4(4+)；炎症程度分为3级：G0(-)、G1(+)、G2(2+)、G3(3+)。血清ALT、AST、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C采用全自动生化仪检测；肝组织匀浆TG采用异丙醇提取、氧化铝吸附磷脂和乙酰丙酮显色法测定，CHOL采用异丙醇提取，高铁、硫酸显色法测定 ......
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