眼针对局灶脑缺血再灌注损伤保护机制研究(1)
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3.沈阳市中医院，辽宁 沈阳 110003)
摘 要：目的：探讨眼针疗法治疗缺血脑血管病的可能机制。方法：采用随机分组将大鼠分为假手术组、模型组与眼针组，改良的线栓方法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型；取上焦区、下焦区、肝区、肾区为施加因素；采用神经功能缺损评分，TUNEL法检测细胞凋亡。结果：眼针组与模型组比较神经功能缺损评分统计学差异(P<0.01)；眼针组与模型组比较凋亡细胞数3h时间点，无显著性差异(P>0.05)；24h、72h时间点有显著差异 (P<0.01)。结论：眼针可降低脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损症状评分，抑制缺血半暗区神经细胞凋亡。
关键词：缺血再灌注；梗死体积；神经功能缺损评分；眼针疗法
中图分类号：R743.31 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2011)04-0735-03
Abstract:Objective: The subject is to probe the possible mechanism of eye-acupuncture in the treatment of Ischemic Cerebrovascular Disease.Method: Divided the rats into 3 groups by random, that is, the sham-operated group, model group and eye-acupuncture group，Make the model rat of focal cerebral ischemia-reperfusion according to the improved method；to take on the Shangjiao area, Xiajiao area, liver area, kidney area for the imposition factors ；Make the scores of neurological function deficits ，detect neuronal apoptosis by the TUNEL method；Results: eye-acupuncture group compared with model group are significantly different (P<0.01)at the scores of neurological function deficits ；The eye needle group and the model group compare, 3 hour non-significance difference(P>0.05)；24 hour, 72 hours have the unusual significance difference(P<0.01).Conclusion: Eye- acupuncture can reduce the scores of neurological function deficit of the cerebral ischemia-reperfusion rats, improve the injury of impaired neuron in penumbra.
Key words:ischemia-reperfusion infarct volume scores of neurological function deficit the therapy of eye-acupuncture
缺血再灌注损伤的病理机制十分复杂，而目前认为缺血半暗带区神经元死亡的主要形式是凋亡【sup】[1]【/sup】。细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自主性死亡,即程序性细胞死亡(PCD),具有主动性、选择性、可逆性的特点【sup】[2]【/sup】。眼针疗法治疗脑血管病经过30余年的临床实践，疗效肯定，本项实验研究从细胞凋亡途径进一步探讨其作用机制，为临床治疗提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 动物分组
选择健康雄性SD大鼠90只，由中国医科大学实验动物中心提供。体重(260±20)g，随机分为假手术组、眼针组与造模组，每组再分为3h，24h，72h时间点3个亚组。
1.2 试剂及仪器
细胞凋亡检测(TUNEL法)试剂盒， DAB显色试剂盒均由武汉博士德生物工程有限公司提供。倒置荧光显微镜，OLYMPUS BX50。切片机，德国LEICA：RM2135。计算机图像分析仪，北京航空大学图像中心。
1.3 模型制作方法
1.3.1 模型制作栓线的处理 取3.0号钓鱼用尼龙丝线剪成长45mm的栓线，将头端火焰烧成光滑球面直径为0.25～0.28 mm ,距球面30mm处用修正液做标记，酒精消毒后置生理盐水中备用。
1.3.2 模型制作 参照 Longa【sup】[3]【/sup】改良的线栓方法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，术前禁食12h,不禁水，10%水合氯醛 (330mg/kg )腹腔麻醉 ,消毒颈部皮肤 ,沿颈中线偏右做一长度约1cm的切口 ,仔细分离暴露出右侧颈总动(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA) ......
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