白术的质量评价研究(1)
摘 要：白术为“健脾补气第一要药”，具有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎等功效，为临床用大宗药材之一，更为“浙八味”、“磐五味”之一。针对白术的含量测定、薄层鉴别等进行综述，以期更好地控制白术药材及饮片的质量，为白术(尤其是浙产白术)的质量评价提供参考和依据。
关键词：白术；含量测定；指纹图谱；质量评价
中图分类号：R285文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2011)04-0823-03
收稿日期：2010-11-17
基金项目：浙江省科技厅分析测试科技计划资助项目
(2008F70027)
作者简介：王知青(1986-)，女，硕士研究生，研究方向：中药成分分析、中药质量标准及中药新药研发。
, 百拇医药
通讯作者：尹华(1965-)，女，教授，博士研究生导师，研究方向：中药成分分析、中药药效物质基础、中药质量标准及中药新药研发。
白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，味苦、甘，性温，归脾、胃经；具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效，为“健脾补气第一要药”【sup】[1]【/sup】。其主要化学成分为苍术酮及内酯类成分，现有文献报道中白术的质量控制研究大多集中在这两类成分。至2010版药典白术药材及饮片项下仅收载苍术酮的定性鉴别，其含量测定一直缺项。为更好地控制白术药材及饮片的质量，为临床合理应用提供科学依据，本文对白术的质量控制研究等进行综述。
1 含量测定
1.1 HPLC法
现代药理研究表明，苍术酮有抗癌抗肿瘤、调节胃肠运动和胃肠功能等【sup】[2]【/sup】作用，而内酯类成分(白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等)则为白术中抗炎、抗癌，调节胃肠道功能和促进营养物质吸收的有效成分【sup】[3]【/sup】，因而常作为检测指标；制剂中由于工艺中的损失等，苍术酮较难检测到，故大多采用白术内酯为含测指标。目前白术的含量测定以HPLC法为主，多以甲醇超声30min制备供试品溶液，采用甲醇-水、乙腈-水(磷酸)流动相体系，以HPLC-UV/DAD法测定其含量。
, 百拇医药
郝延军等【sup】[4]【/sup】以苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ为指标，用四种流动相系统分别建立了白术生品、炮制品的含量测定方法，以此作为白术的质量控制依据之一。禹琦等【sup】[5]【/sup】建立了归脾丸中白术内酯Ⅰ的含测方法，进而控制归脾丸中白术内酯Ⅰ的含量以达到质控目的。王喜军等【sup】[6]【/sup】采用RP-HPLC法测定枳术丸中白术内酯Ⅰ的含量，可以有效地控制枳术丸的质量。
于永明等【sup】[7]【/sup】用HPLC法测定了麸炒白术中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ的含量，建立了HPLC法同时测定白术内酯Ⅰ、Ⅲ的分析方法，制定了白术炮制品的质量标准，方法准确可靠，重复性好，待测组分无干扰，可作为白术的质量控制方法。王欣之等【sup】[8]【/sup】建立了同时测定玉屏风散中色原酮、黄酮和内酯类9种成分的含量的方法，对玉屏风散进行质量监控，其中白术中指标成分为白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ。
段启等【sup】[9]【/sup】用HPLC-DAD法梯度洗脱同时测定白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，选择两个信号记录色谱图(其中白术内酯Ⅰ、Ⅲ检测波长为220nm，白术内酯Ⅱ则为276nm)，制定白术含量测定方法，为控制白术生品及炮制品的质量提供参考。
, http://www.100md.com
1.2 微管液相法
寿旦等【sup】[10]【/sup】运用微管液相法，对浙江、安徽、江西等种质在浙江磐安中药研究所白术药材基地复种后的样品进行含量测定，同时测定白术中苍术酮、白术内酯I、Ⅲ的含量，并应用于白术药材的品质评价及药材种质资源复种、栽培及优秀种源的选择，取得了良好的效果。
1.3 气质联用法
朱军等【sup】[11]【/sup】以白术中白术内酯Ⅰ、Ⅲ为指标，用二氧化碳超临界流体萃取法提取样品，萃取液用乙酸乙酯溶解得供试液，以石英毛细管色谱柱DB-5MS(30 m×0.32 mm，0.25μm)为色谱柱，采用选择离子监测法定量，建立了气质联用法同时测定白术中白术内酯I、Ⅲ含量的分析方法。方法专一性好，灵敏度高，白术内酯I和Ⅲ最低检测限分别达到16和25 pg。
郭方遒等【sup】[12]【/sup】考察了3种萃取头的萃取能力并以色谱峰总峰面积为参数优化SPME操作条件。采用GC-MS技术对顶空固相微萃取(HS-SPME)和水蒸气蒸馏(SD)所提取的组分进行分析，实验结果显示，两种方法所提取得到组分基本相同，但SPME能更简便、快速、提取组分完全而更适用于白术中挥发性成分的提取和半定量分析，从而建立了HS-SPME-GC-MS分离鉴定白术中挥发性成分的分析方法。
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2 薄层色谱法【sup】[1，13-16]【/sup】
白术的薄层色谱研究以药典方法为多，采用加正己烷超声处理，过滤得供试液，以石油醚(60-90度)-乙酸乙酯(50∶1)为展开剂，5%香草醛硫酸溶液显色，加热至斑点显色。亦有改用石油醚、乙醚为溶媒，采用冷浸、超声、加热回流、萃取等方法制备供试液，以石油醚-乙酸乙酯、乙醚-乙酸乙酯、环己烷-乙酸乙酯、正己烷-苯-乙酸乙酯等为展开剂，5%香草醛硫酸、10%硫酸乙醇、5%香草醛硫酸乙醇溶液、5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸溶液为显色剂进行白术的TLC专属性鉴别试验。
3 指纹图谱研究
于超等【sup】[17]【/sup】应用HPLC法建立了酉阳规范化种植白术的指纹图谱，应用中药色谱图分析和数据管理软件辅助自动进行峰匹配，确定11个共有峰，以2号样品色谱图作为模板，利用相关系数法和夹角余弦法计算指纹图谱的相似度，结果两种计算方法全图谱相似度均>93%，表明所建立指纹图谱的技术指标稳定，重现性好，可作为白术药材的质控标准。
, 百拇医药
黎琼红等【sup】[18]【/sup】对13批不同产地的白术样品进行测定，标定了24个共有峰，并通过“中药指纹图谱计算机辅助相似度软件”和聚类分析等方法计算相似度等相关参数，建立白术指纹图共有模式；各样品之间的相似度均在0. 9以上，与共有模式的相似度均在0. 95，为更好地控制白术内在质量提供了科学依据。
叶燕等【sup】[19]【/sup】对13批白术样品应用HPLC图谱研究，采用药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004版》对所有图谱进行比较，确定12个峰为共有峰，相对峰面积的RSD在l6.61%～65.04%，共有峰相对保留时间的RSD在0.02%～0.03%。
叶文文等【sup】[20]【/sup】运用UPLC技术对临安市西天目后院村、九思坞、顺溪、湍口、天台、磐安等地采集购买的32批白术进行指纹图谱研究，比较了两种相似度计算软件及相关系数法、夹角余弦法对实验结果进行分析，最终选定夹角余弦法以及“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”软件，能取得更好的相似度计算结果，各批白术药材的相似度大于90%，建立的共有模式较为可靠，可有效鉴别药材的真伪，评价药材的质量。
田兰等【sup】[21]【/sup】以己酸孕酮为内标，甲醇超声提取样品，选用迪马Luna C【sub】18【/sub】柱，乙腈-水(60∶30)，检测波长230nm为色谱条件，建立了指纹图谱化学识别模式，共获得45个色谱峰，对32个样品采用聚类分析和逐步判别分析，建立了样品的质量评价方法，并进行质量分级。, http://www.100md.com(王知青 尹华 王玲 叶汕)
关键词：白术；含量测定；指纹图谱；质量评价
中图分类号：R285文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2011)04-0823-03
收稿日期：2010-11-17
基金项目：浙江省科技厅分析测试科技计划资助项目
(2008F70027)
作者简介：王知青(1986-)，女，硕士研究生，研究方向：中药成分分析、中药质量标准及中药新药研发。
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通讯作者：尹华(1965-)，女，教授，博士研究生导师，研究方向：中药成分分析、中药药效物质基础、中药质量标准及中药新药研发。
白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，味苦、甘，性温，归脾、胃经；具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效，为“健脾补气第一要药”【sup】[1]【/sup】。其主要化学成分为苍术酮及内酯类成分，现有文献报道中白术的质量控制研究大多集中在这两类成分。至2010版药典白术药材及饮片项下仅收载苍术酮的定性鉴别，其含量测定一直缺项。为更好地控制白术药材及饮片的质量，为临床合理应用提供科学依据，本文对白术的质量控制研究等进行综述。
1 含量测定
1.1 HPLC法
现代药理研究表明，苍术酮有抗癌抗肿瘤、调节胃肠运动和胃肠功能等【sup】[2]【/sup】作用，而内酯类成分(白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等)则为白术中抗炎、抗癌，调节胃肠道功能和促进营养物质吸收的有效成分【sup】[3]【/sup】，因而常作为检测指标；制剂中由于工艺中的损失等，苍术酮较难检测到，故大多采用白术内酯为含测指标。目前白术的含量测定以HPLC法为主，多以甲醇超声30min制备供试品溶液，采用甲醇-水、乙腈-水(磷酸)流动相体系，以HPLC-UV/DAD法测定其含量。
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郝延军等【sup】[4]【/sup】以苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ为指标，用四种流动相系统分别建立了白术生品、炮制品的含量测定方法，以此作为白术的质量控制依据之一。禹琦等【sup】[5]【/sup】建立了归脾丸中白术内酯Ⅰ的含测方法，进而控制归脾丸中白术内酯Ⅰ的含量以达到质控目的。王喜军等【sup】[6]【/sup】采用RP-HPLC法测定枳术丸中白术内酯Ⅰ的含量，可以有效地控制枳术丸的质量。
于永明等【sup】[7]【/sup】用HPLC法测定了麸炒白术中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ的含量，建立了HPLC法同时测定白术内酯Ⅰ、Ⅲ的分析方法，制定了白术炮制品的质量标准，方法准确可靠，重复性好，待测组分无干扰，可作为白术的质量控制方法。王欣之等【sup】[8]【/sup】建立了同时测定玉屏风散中色原酮、黄酮和内酯类9种成分的含量的方法，对玉屏风散进行质量监控，其中白术中指标成分为白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ。
段启等【sup】[9]【/sup】用HPLC-DAD法梯度洗脱同时测定白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，选择两个信号记录色谱图(其中白术内酯Ⅰ、Ⅲ检测波长为220nm，白术内酯Ⅱ则为276nm)，制定白术含量测定方法，为控制白术生品及炮制品的质量提供参考。
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1.2 微管液相法
寿旦等【sup】[10]【/sup】运用微管液相法，对浙江、安徽、江西等种质在浙江磐安中药研究所白术药材基地复种后的样品进行含量测定，同时测定白术中苍术酮、白术内酯I、Ⅲ的含量，并应用于白术药材的品质评价及药材种质资源复种、栽培及优秀种源的选择，取得了良好的效果。
1.3 气质联用法
朱军等【sup】[11]【/sup】以白术中白术内酯Ⅰ、Ⅲ为指标，用二氧化碳超临界流体萃取法提取样品，萃取液用乙酸乙酯溶解得供试液，以石英毛细管色谱柱DB-5MS(30 m×0.32 mm，0.25μm)为色谱柱，采用选择离子监测法定量，建立了气质联用法同时测定白术中白术内酯I、Ⅲ含量的分析方法。方法专一性好，灵敏度高，白术内酯I和Ⅲ最低检测限分别达到16和25 pg。
郭方遒等【sup】[12]【/sup】考察了3种萃取头的萃取能力并以色谱峰总峰面积为参数优化SPME操作条件。采用GC-MS技术对顶空固相微萃取(HS-SPME)和水蒸气蒸馏(SD)所提取的组分进行分析，实验结果显示，两种方法所提取得到组分基本相同，但SPME能更简便、快速、提取组分完全而更适用于白术中挥发性成分的提取和半定量分析，从而建立了HS-SPME-GC-MS分离鉴定白术中挥发性成分的分析方法。
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2 薄层色谱法【sup】[1，13-16]【/sup】
白术的薄层色谱研究以药典方法为多，采用加正己烷超声处理，过滤得供试液，以石油醚(60-90度)-乙酸乙酯(50∶1)为展开剂，5%香草醛硫酸溶液显色，加热至斑点显色。亦有改用石油醚、乙醚为溶媒，采用冷浸、超声、加热回流、萃取等方法制备供试液，以石油醚-乙酸乙酯、乙醚-乙酸乙酯、环己烷-乙酸乙酯、正己烷-苯-乙酸乙酯等为展开剂，5%香草醛硫酸、10%硫酸乙醇、5%香草醛硫酸乙醇溶液、5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸溶液为显色剂进行白术的TLC专属性鉴别试验。
3 指纹图谱研究
于超等【sup】[17]【/sup】应用HPLC法建立了酉阳规范化种植白术的指纹图谱，应用中药色谱图分析和数据管理软件辅助自动进行峰匹配，确定11个共有峰，以2号样品色谱图作为模板，利用相关系数法和夹角余弦法计算指纹图谱的相似度，结果两种计算方法全图谱相似度均>93%，表明所建立指纹图谱的技术指标稳定，重现性好，可作为白术药材的质控标准。
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黎琼红等【sup】[18]【/sup】对13批不同产地的白术样品进行测定，标定了24个共有峰，并通过“中药指纹图谱计算机辅助相似度软件”和聚类分析等方法计算相似度等相关参数，建立白术指纹图共有模式；各样品之间的相似度均在0. 9以上，与共有模式的相似度均在0. 95，为更好地控制白术内在质量提供了科学依据。
叶燕等【sup】[19]【/sup】对13批白术样品应用HPLC图谱研究，采用药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004版》对所有图谱进行比较，确定12个峰为共有峰，相对峰面积的RSD在l6.61%～65.04%，共有峰相对保留时间的RSD在0.02%～0.03%。
叶文文等【sup】[20]【/sup】运用UPLC技术对临安市西天目后院村、九思坞、顺溪、湍口、天台、磐安等地采集购买的32批白术进行指纹图谱研究，比较了两种相似度计算软件及相关系数法、夹角余弦法对实验结果进行分析，最终选定夹角余弦法以及“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”软件，能取得更好的相似度计算结果，各批白术药材的相似度大于90%，建立的共有模式较为可靠，可有效鉴别药材的真伪，评价药材的质量。
田兰等【sup】[21]【/sup】以己酸孕酮为内标，甲醇超声提取样品，选用迪马Luna C【sub】18【/sub】柱，乙腈-水(60∶30)，检测波长230nm为色谱条件，建立了指纹图谱化学识别模式，共获得45个色谱峰，对32个样品采用聚类分析和逐步判别分析，建立了样品的质量评价方法，并进行质量分级。, http://www.100md.com(王知青 尹华 王玲 叶汕)