产地\采收季节对猕猴桃根药材中多糖含量的影响(2)
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2.1.2 5%苯酚溶液的制备 称取苯酚100g于烧瓶中，加入0.1g铝片，0.05g碳酸钠，加热蒸馏，收集182℃馏分。称取蒸馏后的苯酚5g置100mL容量瓶中，加适量水溶解，稀释至刻度，摇匀，备用。
2.1.3 供试液的制备 精密称取ACPS约25 mg，用20mL水加热溶解，冷却，移置25mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，备用。精密量取1 mL置25mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。
2.1.4 检测波长的选择 精密量取对照品液与供试液各1.0mL，置具塞试管中，分别精密加入5%苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速精密加入硫酸5.0mL，摇匀，置沸水浴加热15min，取出冷却至室温。另以蒸馏水1.0mL同上操作作空白，于400nm～800nm进行波长扫描，结果对照品液与供试液在487nm处均有最大吸收，故选择测定波长为487nm。
2.1.5 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，分别置具塞试管中，加蒸馏水至1.0mL。各精密加入5%苯酚溶液1.0mL，摇匀，迅速精密加入硫酸5 .0mL，摇匀，置沸水浴加热15 min，取出冷却至室温。以相应的试剂为空白，在487 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果回归方程：A0.0101C+0.0163，r0.9999，表明对照品溶液在20.38～101.9μg/mL范围内吸光度与浓度有良好的线性关系。
2.1.6 精密度试验 精密量取对照品液1.0 mL置具塞试管中，按照“2.1.5标准曲线的制备”项下自“精密加入5%苯酚溶液1.0mL”起依法操作，测定吸光度，连续测定6次，记录吸光度，计算RSD值，结果RSD为 0.12%，表明仪器精密度良好。
2.1.7 重复性试验 取同一批ACPS，精密称定约25 mg，6份，按照“2.1.3 供试液的制备”项下操作制备供试液，分别精密量取1.0 mL置具塞试管中，按照“2.1.5标准曲线的制备”项下自“精密加入5%苯酚溶液1mL”起依法操作，测定吸光度，采用标准曲线法计算供试液中多糖浓度，计算ACPS多糖含量的RSD，结果RSD为3.57%，表明该方法重现性良好。
2.1.8 稳定性试验 精密量取供试液1.0 mL置具塞试管中，按照“2.1.5标准曲线的制备”项下自“精密加入5%苯酚溶液1.0mL”起依法操作，于冷却至室温后的0，20，40，60，80，100，120min测定吸光度，计算RSD值，结果RSD为2.49%，表明供试液在显色后的120min内稳定。
2.1.9 回收率试验 取已知含量的ACPS约 25mg，6份，精密称定，按照“2.1.3 供试液的制备”项下操作制备供试液。分别精密量取1.0mL，置25mL容量瓶中，各加入当量的半乳糖对照品，稀释至25 mL，摇匀。精密量取1.0 mL置具塞试管中，按照“2.1.5标准曲线的制备”项下自“精密加入5%苯酚溶液1.0mL”起依法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试液中多糖浓度，计算回收率。结果回收率为100.6%～104.4%，平均回收率为102.4%，RSD1.51%，表明该法测定结果可靠。
2.2 猕猴桃根多糖的提取
参考文献【sup】[2]【/sup】，取猕猴桃根100g，加10倍量水浸泡2h，加热回流提取2h，提取3次，合并提取液，以3500r/min离心10min，除去不溶物，上清液减压浓缩至200mL，加入95%乙醇致醇浓度为70%，静置12h,，7000r/min离心10min，沉淀以无水乙醇洗3次，80℃真空干燥至恒重，精密称定。
2.3 不同产地猕猴桃根中多糖含量的比较
(1)取江西、陕西、云南、四川、广西、广东等产地的猕猴桃根各100g，按2.2制备猕猴桃根多糖。
(2)精密称定上述猕猴桃根多糖粉末各约30mg，于25mL容量瓶中，以适量蒸馏水溶解并稀释至刻度，精密移取2mL至25mL容量瓶中，加水稀释至刻度，精密移取1.0mL,照标准曲线制备项下方法，自“加入5%苯酚溶液1.0mL”项起，依法测定吸光度；同时按“标准曲线的绘制”项操作，随行标准曲线，采用标准曲线法，计算药材中猕猴桃根多糖含量，结果见表1。根据结果可知，不同产地的猕猴桃根中多糖含量差异较大，四川产的猕猴桃根中多糖含量为江西产的7倍多。
表1 不同产地猕猴桃根多糖的含量测定结果(n3)
2.4 不同采收季节猕猴桃根中多糖含量的比较
(1)取春、冬两季采集的贵州、福建、安徽等地猕猴桃根药材各100g ......
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