1.2 实验方法

    1.2.1 实验分组及处理 清洁级雄性SD大鼠96只，随机分成四组，每组各24只：空白组正常喂养，每天给予生理盐水1mL/100g灌胃；模型组、补肺汤组、强的松组于博莱霉素造模后第2天始，分别给予生理盐水1mL/100g、1g/mL的补肺汤1mL/100g、0.63g/L的强的松混悬液0.63mg/100g灌胃，每日1次，直到处死时，分别于造模后第7、14、28天每组各处死8只大鼠。

    1.2.2 造模方法 主要参考文献报道\[1\]。

    1.2.3 标本收集 各组予造模后第7、14、21天分别处死8只大鼠，取肺组织。切取右肺在生理盐水中漂洗干净，取右肺中叶置于10%甲醛中固定，脱水、透明、浸蜡和包埋等制作成石蜡组织块和切片，测定MMP-9、TIMP-1；行HE和MASSON染色，观察肺泡炎分度和肺纤维化分级。

    1.2.4 标本检测

    (1)光学显微镜观察肺组织结构变化：石蜡切片的HE染色(苏木素-伊红染色)；石蜡切片的Masson染色。

    (2)病理形态学定量分析 组织病理学的病变程度：根据Szapiel等\[2\]的方法确定肺泡炎和肺纤维化的程度，并参照张动伟等提供的标准将肺泡炎和肺纤维化分级并计算积分，进行病理半定量分析。具体标准见表1。

    (3)免疫组化 MMP9和TIMP1的测量

    使用HPIAS-1000病理图文分析系统对免疫组化的表达采用定量检测分析的方法：每张切片随机采集2视野(×200倍)测量其阳性细胞的平均光密度 ......