益气补肾法对自然流产模型小鼠脾T淋巴细胞亚群的影响(3)
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参见附件。
2.2.3 各组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比
孕9天时，与阴性对照组相比，中药组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比含明显减低，有一定的下降趋势，但不具有统计学意义(P> 0.05)(表2)。CSA组CD4+T细胞占CD8+T细胞的百分比含量稍有下降，且不具有统计学意义(P> 0.05)(表3)。中西医结合组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比含显著减低，有一定的下降趋势，但不具有统计学意义(P> 0.05)(表2)。各治疗组按CD4+T细胞/CD8+T细胞的比值由低到高排序，依次为：中药组、中西医结合组、CSA组(表2、图2)。孕14天时，各治疗组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比之间无明显差异(P> 0. 05)。
3 讨 论
雌性CBA小鼠与雄性DBA/2小鼠交配是经典的自然流产模型。其胚胎丢失率较其它小鼠交配所致的胚胎丢失率远远增高。近年来，国内外学者进行自然流产的实验研究，均以CBA×DBA/2作为模型使用。流式细胞术(FlOW cytometry，FCM)是利用流式细胞仪对生物颗粒(如细胞、微生物等)的多种物理和生物学特性进行定量分析，并对特定细胞群体加以分选的新的细胞参量计量技术，已被广泛应用与基础及临床医学研究中。
反复自然流产是妊娠期常见的一种并发症，其病因涉及遗传、免疫、内分泌及感染等多种因素。但在40%～60%病因不明的RSA患者中，多数是由于母胎免疫调节异常所致[8]。近年来的研究发现，T淋巴细胞及其亚群对胚胎在母体内免遭排斥及正常发育起着重要的免疫调节作用。CD3为T细胞表面重要的分化抗原；天然产生的CD4+CD8+T细胞是一群具有免疫调节功能的细胞，成为调节性T细胞(Regulatory T ceils, Treg)，CD4+CD8+T细胞在自然条件下处于无能状态，具有自身免疫防御作用，即抑制其他CD4+T细胞和CD8+T细胞的活性能力，而且抑制作用是抗原非特异性的。该细胞可能通过细胞与细胞的直接接触发挥作用，并且其抑制作用与细胞表面的细胞毒素T淋巴细胞相关抗原4(CnA4)的表达密切相关。CD4+CD8+T细胞在不同种属存在进化保守性，人及鼠的CD4+CD8+T具有类似的表型和分布，能够广泛地识别各种不同的自身或外来抗原，在体外均具有抑制T细胞增殖和/或维持自身耐受的作用。
3.1 实验方对自然流产模型脾脏CD4+T细胞的影响
孕早期(9天)时，自然流产模型脾脏CD4+T细胞的表达情况：与阴性对照组相比，中药组CD4+T细胞占CD3+T细胞的百分比明显减低，且具有统计学意义(P< 0.05)，说明实验方对孕早期脾脏CD4+T细胞表达具有下调作用，提示CD4+T淋巴细胞亚群比率降低，使母体细胞免疫功能减弱，对胚胎的免疫排斥反应减小，促进妊娠继续。而CSA、中西医结合组与阴性对照组相比，CD4+T细胞占CD3+T细胞的百分比也均降低，有明显的下降趋势，但不具有统计学意义(P> 0.05)，提示CSA、中西医结合组虽然不具用统计学上意义，但下降的趋势，可能为样本量不足有关，同样可以促进妊娠继续。对各治疗组按CD4+T细胞占CD3+T细胞的百分比由低到高排序，依次为：中药组、中西医结合组、CSA组，各组间无明显差异(P> 0. 05)，提示实验方在孕早期脾脏CD4+T细胞表达具有下调作用比中西医结合组、CSA组更明显。孕中晚期(14天)时，各治疗组CD4+T细胞占CD3+T细胞的百分比无明显差异(P> 0.05)，表明实验方对孕晚期脾脏无明显调节趋势。
3.2 实验方对自然流产模型脾脏CD8+T细胞的影响
以CD8+作为特异性标记，进行脾脏细胞分选。孕9天时，与阴性对照组相比，中药组CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比含量明显增高，有一定的上升趋势，但不具有统计学意义(P>0.05)。CSA组CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比含量无明显变化，且不具有统计学意义(P>0.05)。中西医结合组CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比含量有一定的增加，有明显的上升趋势，但不具有统计学意义(P>0.05)。各治疗组按CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比由高到低排序，依次为：中药组、中西医结合组、CSA组，统计学分析显示各组间无明显差异(P>0. 05)说明实验方对孕早期脾脏CD8+T细胞表达具有上调趋势，而且比中西医结合组CSA更明显，CD8+T淋巴细胞占CD3+T细胞的百分比的升高，CD8+T淋巴细胞在机体免疫应答过程中起免疫负调节作用，被认为是抑制性T淋巴细胞，它既可以抑制由B细胞介导的体液免疫，也可以抑制CD4+T淋巴细胞介导的迟发性超敏反应及增殖反应等，提示实验方优与中西医结合组 CSA组，有利于妊娠。孕14天时，各治疗组CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比无明显差异(P>0.05)提示实验方对孕中晚期脾脏CD8+T无明显调节作用。
3.3 实验方对自然流产模型脾脏CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比变化的影响
孕9天时，与阴性对照组相比，中药组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比含明显减低，有一定的下降趋势，但不具有统计学意义(P> 0.05)。CSA组CD4+T细胞占CD8+T细胞的百分比含量稍有下降，且不具有统计学意义(P>0.05)。中西医结合组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比含显著减低，有一定的下降趋势，但不具有统计学意义(P>0.05)。CD4+/CD8+比例关系是机体免疫功能网络调控的重要枢纽，调控免疫进行的方向。各治疗组按CD4+T细胞/CD8+T细胞的比值由低到高排序，依次为：中药组、中西医结合组、CSA组。提示中药组CD4+/CD8+减低最明显，表明实验方对孕早期脾脏具有下调趋势。孕14天时，各治疗组CD4+T细胞/CD8+T细胞的百分比之间无明显差异(P> 0 ......
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