孝扇草抗炎镇痛有效部位的筛选研究(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
1.3仪器
ISO9001电子分析天平，赛多利斯科学仪器(北京)有限公司；YLS-6B智能热板仪：北京吉安得尔科技有限公司。
2实验方法[6-7]
2.1孝扇草水提物及醇提物对热板法小鼠痛阈值的影响
雌性ICR小鼠40只(剔除过敏感及不敏感动物)，体重(20±2)g，随机分为4组，每组10只，即空白对照组，孝扇草水提组、醇提组，以生药量计浓度均为10g/kg，阳性组给予0.25g/kg的阿司匹林，连续7天，末次给药30min后，将小鼠放在55℃热板上，以小鼠舔后足或跳跃反应潜伏期为痛阈指标，记录在热板上停留的时间。
2.2孝扇草水提物及醇提物对醋酸致小鼠扭体的影响
雄性ICR小鼠40只，体重(20±2)g，分组与给药方法同2.1，每组10只，连续给药7天，末次给药30min后，各小鼠腹腔注射0.6%的乙酸0.1mL/10g，然后观察15min内由乙酸引起的扭体次数，并计算抑制率。抑制率=(空白对照组平均扭体次数-试药组平均扭体次数)/空白对照组平均扭体次数。
2.3孝扇草醇提各溶剂萃取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
雄性ICR小鼠60只，体重(20±2)g，随机分为6组，每组10只，即空白对照组，孝扇草醇提石油醚萃取物组(Ⅰ组)、乙酸乙酯萃取物组(Ⅱ组)、正丁醇萃取物组(Ⅲ组)、各溶剂萃取后剩余部位组(Ⅳ组)，以生药量计浓度均为10g/kg，阳性药组给予0.25g/kg的阿司匹林。灌胃给药，每天1次，连续给药7天，空白对照组给同体积蒸馏水，末次给药1h后，于小鼠右耳前后涂二甲苯0.02mL/只，左耳不做任何处理。45min后将动物断椎处死，剪下双耳，用9mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，电子天平称重，每鼠右耳重量减去左耳重量为肿胀度，肿胀抑制率=(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100%。
2.4孝扇草醇提各溶剂萃取物对热板法小鼠痛阈的影响
雌性ICR小鼠60只(剔除过敏感及不敏感动物)，体重(20±2)g，分组与给药方法同2.3，连续7天，末次给药30min，将小鼠放在55℃热板上，以小鼠舔后足或跳跃反应潜伏期为痛阈指标，记录在热板上停留的时间。
2.5孝扇草醇提各溶剂萃取物对醋酸致小鼠扭体的影响
雄性ICR小鼠72只，体重(20±2)g，分组与给药方法同2.3，每组12只，连续给药7天，末次给药30min后，各小鼠腹腔注射0.6%的乙酸0.1mL/10g，然后观察15min内由乙酸引起的扭体次数，并计算抑制率。抑制率=(空白对照组平均扭体次数-试药组平均扭体次数)/空白对照组平均扭体次数。
2.6统计学处理
应用SPSS 11.0统计软件进行数据处理分析，所有指标均以均数±标准差±s表示，组间比较采用t检验。
3实验结果
3.1孝扇草水提物及醇提物对热板法小鼠痛阈值的影响
以孝扇草水提物和醇提物分别灌胃给药7天后，测小鼠痛阈值，与空白组对照，小鼠痛阈值均显著升高(P<0.05，P<0.01)，且醇提组效果比水提组效果更显著。结果见表1。
3.2孝扇草水提物及醇提物对醋酸致小鼠扭体的影响
以孝扇草水提物和醇提物分别灌胃给药7天后，测小鼠扭体次数，并计算扭体抑制率，与空白组对照，小鼠扭体次数显著减少，水提组和醇提组扭体抑制率分别为46.12%，92.99%，结果显示，其水提物和醇提物均能显著减轻小鼠疼痛，且醇提组比水提组效果更显著(P<0.001，P<0.01)，结果见表2。
3.3孝扇草醇提各溶剂萃取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
孝扇草醇提各溶剂萃取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响结果见表3，孝扇草醇提乙酸乙酯萃取物组(Ⅱ组)对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用(P<0.05)。
3.4 孝扇草醇提各溶剂萃取物对热板法小鼠痛阈的影响
孝扇草醇提各溶剂萃取物对热板法小鼠痛阈的影响见表4。结果表明孝扇草醇提乙酸乙酯萃取物组(Ⅱ组)和各溶剂萃取后剩余部位组(Ⅳ组)能显著提高小鼠的痛阈值，与空白组对照有显著差异(P<0.05)。
3.5 孝扇草醇提各溶剂萃取物对醋酸致小鼠扭体的影响
孝扇草醇提各溶剂萃取物对醋酸致小鼠扭体的影响见表5，由表5可知，孝扇草醇提乙酸乙酯萃取物组(Ⅱ组)和正丁醇萃取物组(Ⅲ组)能明显减少醋酸致小鼠扭体反应次数，与空白组对照具显著性差异(P<0.05)。
4讨 论
本实验采用的小鼠热板法、醋酸致小鼠扭体法和二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验为研究药物的抗炎镇痛作用的经典实验。本实验通过比较孝扇草水提物和醇提物的抗炎镇痛效果，得出孝扇草醇提物抗炎镇痛作用比水提物效果更为显著，因此对其醇提物进行系统溶剂萃取，并对各部位进行抗炎镇痛实验，从孝扇草醇提物各分离部位的抗炎结果看，孝扇草醇提乙酸乙酯萃取部位能明显抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀，具有一定的抗炎作用，其作用机制可能与降低毛细血管通透性、减少渗出有关。孝扇草醇提乙酸乙酯萃取部位和剩余部位能提高小鼠的痛阈值，其醇提乙酸乙酯、正丁醇萃取部位能减少醋酸引起的小鼠扭体次数。综上所述，可初步确定孝扇草醇提乙酸乙酯部位为抗炎镇痛主要有效部位。
目前国内外有关孝扇草的研究甚少，古籍中记载其具有良好的抗风湿作用，在民间被用于治疗咳嗽，肾炎水肿，风湿性关节疼痛，痹症等病症[1]。本实验筛选出孝扇草抗炎镇痛的有效部位，为今后研究开发孝扇草治疗类风湿性关节炎的相关制剂提供理论依据，同时也为继续研究孝扇草抗类风湿性关节炎的活性成分奠定了基础。
参考文献
[1] 全国中草药汇编编写组. 全国中草药汇编[M].2版.北京：人民卫生出版社，1996:630 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1941kb)。