恶露不尽气虚证型动物模型建立及评价标准和作用机制的研究(3)
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中医是通过望、闻、问、切四诊辨证施治的,目前在动物身上还只可体现望诊,因此考虑观察动物的舌象和恶露。本实验设计肉眼和显微观察大鼠舌色、舌苔、舌质状况,以及恶露色泽、血量、出血时间等,以期体验在动物的中医望诊药理学方法。显微观察舌象情况与大鼠舌组织病理图像测定舌乳头密度、菌状乳头密度、舌苔厚度,各组与气虚模型组比较,恶露模型组和气虚治疗组的顶端舌苔厚度、气虚治疗组的底端舌苔厚度、恶露模型组的乳头密度增加有显著性差异的结果吻合。表明舌象变化可做为大鼠恶露不尽气虚证候的观察指标之一,若能稳定拍摄环境,控制背景光源恒定,以及更好地制动麻醉大鼠,便可在色度上进行定量研究,可为动物舌象研究的一个现代化思路方向。
气虚证候的恶露不尽是由体内气血运行虚弱不足而致,恶露情况观察是体现中医望诊之主要方面,恶露色泽观察结果显示增加气虚造模条件的大鼠恶露色泽普遍偏淡,表明游泳疲劳使大鼠气血运行虚弱不足之气虚造型条件施加适宜。恶露出血天数情况,3个造模组恶露出血天数一般为4~5天,组间差异不大,当然造模组与正常对照组的无恶露出血天数比较均差异显著,说明造模恶露出血天数状况成功。恶露出血量情况,正常对照组因有子宫分泌物故洗浸后比色有一定读数,与造模组比较均有显著性差异,表明造模恶露出血量状况成功。气虚模型组较恶露模型组恶露血量减少有显著性差异,表明游泳疲劳气虚条件可使大鼠气血虚弱,血量不足。气虚治疗组较气虚模型组恶露血量减少有显著性差异,表明传统中医治疗气虚经典方补中益气汤可减少气虚证候的恶露量,有较好治疗作用。恶露的观察可看色泽情况,恶露的量化则可在恶露出血量和出血天数方面进行,由此相对舌象来说,恶露的指标量化验证恶露不尽动物模型显然更方便易行,但可归因中医的评价标准指标不多,舌象和恶露最好兼行兼用。
气虚证候的恶露不尽动物模型作用机制的研究可更进一步从子宫、卵巢微观病理和生殖激素等方面了解,用组织病理图像数据自动定量分析管理系统在设定视野定量测定子宫内膜上皮细胞高度和黏膜层高度以及卵巢颗粒层厚度,对卵巢生长细胞、黄体、成熟卵泡个数计数,结果3个造模组均可增加子宫上皮细胞高度,气虚模型组较气虚治疗组和正常对照组的子宫上皮细胞高度增加有显著性差异,表明恶露不尽造模可使子宫上皮增厚而气虚造模条件下上皮增厚稍逊,经典方补中益气汤治疗气虚证时可显著减少子宫上皮厚度,使之趋近于正常而起治疗作用。另外3个造模组均可减少的黏膜层高度,造模组间有气虚模型组较恶露模型组黏膜层高度减少而气虚治疗组较气虚模型组黏膜层高度增加的趋势,但差异不显著。表明该大鼠恶露不尽气虚证候模型对子宫上皮细胞厚度影响较大,换言之,大鼠气虚证候的恶露不尽模型子宫部位主要是通过调节子宫上皮细胞高度而起作用的。卵巢方面从生长细胞、黄体、成熟卵泡个数计数数据看来,各造模组略少于正常对照组但基本无差异,卵泡颗粒层厚度恶露模型组和气虚模型组与正常对照组比较无显著差异,表明诸造模对卵巢作用影响不明显,只殊示卵巢颗粒层厚度气虚治疗组较气虚模型组可显著减少,表明经典方补中益气汤治疗大鼠气虚证恶露不尽时可通过卵巢颗粒层厚度调节而起作用。用ELISA酶联免疫法定量测定大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)、雌三醇(E3)、胎盘催乳素(RPL)。结果气虚模型组和恶露模型组与正常对照组比较,均可使大鼠CG、E3、RPL增加,尤其以RPL增加显著, E3次之,而气虚治疗组与气虚模型组比较,可显著减少大鼠CG、E3、RPL。表明气虚证候模型在生殖激素方面,恶露造模和气虚证候条件恶露造模均可引起使雌性生殖激素增高的变化,经典方补中益气汤通过减少雌性生殖激素而起到治疗作用。
参考文献
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