氯化钙拮抗马兜铃酸肾毒性的体外观察(1)
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摘要：目的：研究分泌性磷脂酶A2(secretory phospholipase A2 ，sPLA2)激活剂氯化钙能否减轻马兜铃酸(aristolochic acid AA)对人肾小管细胞(human kidney cell HKC)的损伤。方法：以体外培养的HKC为研究对象，观察CaCl2对AA肾毒性的影响。检测指标包括MTT490nm处OD值和流式细胞议测定的细胞周期。实验分为正常对照组、单用AA组和合用AA和CaCl2组，结果：(1) AA表现出剂量相关和时间相关的肾毒性。40mg/L AA组细胞490nm处OD值明显下降，联用600μmol/L CaCl2，490nm处OD值有所上升(0.631±0.123 vs 0.492±0.076, P<0.05)。(2) AA可将HKC阻滞在S期和G2/M期。联用 600μmol /L CaCl2 ,促进S期细胞进入G2/M期，逆转S期阻滞。结论：CaCl2可在一定程度上减轻马兜铃酸肾毒性，逆转细胞的增殖受抑状况。
关键词：马兜铃酸；氯化钙；分泌性磷脂酶A2；肾小管细胞；肾毒性
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717(2012)03-0628-03
Effect of CaCl2 on Aristolochic Acid Nephrotoxicity on Human Kidney Cell in Vitro
LIANG Shikai1, XU Feifei2
(1.Division of nephrology,Zhejiang Provincial People’s Hospital, Hangzhou 310014, Zhejiang,China；
2.Division of nephrology,The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou 325000，Zhejiang,China)
Abstract:Objective: To investigate if CaCl2 can relieve the nephrotoxicity of aristolochic acid(AA) on human kidney cells(HKC) in vitro. Methods:HKC was cultured with aristolochic acid or combined with CaCl2. Cell viability was evaluated by the MTT cell proliferation assay. Flow cytometry tested the change of cell cycle. Results: (1) The OD value in 490nm of 40mg L-1 AA group is decreased, as compared with the normal group, which can be inhibited slightly by 600μmol·L-1 CaCl2. (2) HKC could be blocked in S phase and G2/M phase in a dose- and time-dependent manner. To some extent, the following could reverse it: cells of S phase can go into G2/M phase when 600μmol/L CaCl2 is present (P<0.05) . Conclusion:In a way, CaCl2 can relieve inhibition of growth induced by AA.
Key words:aristolochic acid;CaCl2; secretory Phospholipase A2; human kidney cell
收稿日期：2011-10-27
基金项目：温州市科技局资助项目(Y2006A002)
作者简介：梁世凯(1979-)，女，山西长治人，主治医师，硕士，研究方向：马兜铃酸肾病。
通讯作者：许菲菲(1946-)，女，浙江温州人，教授、主任医师，硕士研究生导师，研究方向：慢性肾小管间质性肾炎。马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephropathy AAN)是含AA的中草药引起的一种肾小管间质性疾病。该病特征性的肾脏病理变化是[1]寡细胞性纤维化，浸润的炎细胞少，组织修复能力差。sPLA2[2]在炎症反应和组织修复中发挥着重要的作用。我们已经观察到AA可抑制HKC sPLA2的活性[3]，本文进而研究了sPLA2激活剂氯化钙能否改善马兜铃酸毒性 ......
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