岩柏草总黄酮对大鼠肝损伤保护作用的研究(2)
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参见附件。
2.3.3肝组织病理学检查在光镜下观察肝组织切片的病理形态学变化，肝组织病理学改变分为5级：正常肝细胞“-”、肝细胞点状坏死“+”、肝细胞灶状坏死“++”、肝小叶不足1/3肝细胞坏死“+++”、肝小叶超过1/3肝细胞坏死“++++”。
2.4数据统计处理
采用SPSS软件进行分析，数据结果用均值±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验。
[WT5”FZ〗中华中医药学刊3实验结果
3.1血清各指标
模型组大鼠ALT、AST、MDA、NO和PGE2均显著高于正常组， SOD显著低于正常组；岩柏草总黄酮高中治疗组ALT、AST、MDA、NO和PGE2均低于模型组，SOD高于模型组，具有显著性差异，P<0.05。各实验组血清和肝组织指标检测结果见表1和表2。
表1各组大鼠血清指标ALT、AST、SOD比较(±s)
组别nALT(U/L)AST(U/L)NO(μmol/L)PEG2(pg/mL)正常组1059.0±4.331.6±7.235.6±1.950.3±3.2CCl4模型组9178.3±21.0*100.7±14.6*68.7±5.7*100.2±7.2*低剂量治疗组9155.0±18.190.3±9.260.4±3.880.2±5.6Δ中剂量治疗组10100.5±5.7Δ88.5±7.745.0±3.1Δ72.6±4.1Δ高剂量治疗组877.7±6.7Δ47.3.6±5.9Δ39.7±2.3Δ61.1±3.9Δ对照组1084.0±5.7Δ53.7±6.941.5±3.2Δ56.8±4.0Δ注：与正常组比较，*P<0.05；与模型组比较ΔP<0.05。
表2各组大鼠肝组织SOD、MDA、NO、PEG2比较(±s)
组别nSOD
(NU/mgPr)MDA
(mmol/mgPr)正常组10381.8±24.638.0±2.5CCl4模型组9201.4±27.0*80.1±5.9*低剂量治疗组9228.1±22.675.5±3.9中剂量治疗组10307.8±25.3Δ69.2±4.6高剂量治疗组8355.6±20.4Δ45.7±1.2Δ对照组10366.1±30.1Δ42.4±2.7Δ注：与正常组比较*P<0.05；与模型组比较ΔP<0.05。
3.2病理检查
正常组大鼠肉眼观察肝脏形态正常，被膜光滑，肝小叶结构正常，肝细胞索、汇管区、胆管上皮细胞等形态结构清晰，未见变性、坏死等病理改变。模型组造模后第1~3天肝脏均可见以腺泡Ⅲ带肝细胞为主的不同程度的病理改变，肉眼可见肝脏体积增大，边缘变钝，色黯，质脆，脂肪变性及炎细胞浸润，汇管区缩小，病理评级在“++”~“+++”之间。岩柏草总黄酮治疗组肝细胞索排列较整齐，少数肝细胞轻度水肿，未见明显脂肪变性及坏死，病理评级在“-”~“+”之间，治疗量岩柏草总黄酮可减轻 CCl4致大鼠肝脏病理损伤。水飞蓟宾葡甲胺治疗组肝脏损伤肉眼观察色泽正常，质软，镜下可见中央静脉周围肝细胞脂肪变性，点状坏死，少量炎症细胞浸润，汇管区未见明显异常[3]。
4讨论
CCl4是实验性肝损伤动物模型常用造模剂，CCl4进入机体后，经肝脏细胞色素P450激活，生成三氯甲基自由基，使内质网膜上脂质氧化反应，引起膜结构和功能完整性的破坏，造成肝组织的病理学损伤[4]。同时，肝脏由于CCl4攻击而受到损伤使得转氨酶、炎症介质NO、PGE2异常增高及脂质过氧化的主要产物MDA含量增高、SOD活性降低。
NO又称血管内皮因子，是一种新的免疫分子和炎症介质，在免疫调节和炎症中发挥作用，参与了机体多种生理及病理过程，影响着多种疾病的发展。NO作为一个炎性介质，其具有双重作用，一方面NO是一种强力的血管扩张剂，可引起血管漏出；另一方面NO能抑制PGE2、血栓素、白细胞介素-6的合成，显示抗炎作用。但是，过量的NO本身可作为自由基或通过与自由基反应生成毒性更强的自由基或以尚未明了的方式造成肝损伤。已有大量的证据表明NO在多种原因引起的肝损伤中起重要作用。在中医理论中肝脏是血液循环系统的重要成员,主要表现在“肝藏血”，而NO有助于通过循环系统对肝脏起保护作用。前列腺素是炎症反应的重要介质，炎症的发生发展与前列腺素含量关系密切，而在炎症过程中，PGE2作用最强，是重要的炎症反应介质。本实验结果表明，卷柏既可以抑制肝损伤时NO过量产生，降低大鼠异常增高的NO、PGE2水平。这可能是通过抑制NO的细胞毒效应发挥作用的，提示抑制NO的过量产生是其保肝作用的一个环节[5]。
本次实验研究结果表明卷柏可显著降低血清中ALT、AST，增加机体SOD活力，抑制脂质过氧化反应及其产物MDA的产生，增强机体抗氧化能力，加速自由基的清除；通过抑制NO、PGE2的过量分泌，使血清中异常增高的NO、PGE2含量降低，减轻其介导的炎性反应，从而达到修复肝细胞损伤的作用，保护肝脏的结构和功能。这些可能就是岩柏草对CCl4所致肝组织损伤具有保护作用的药理作用机制。此次实验研究补充了岩柏草在保护肝组织损伤方面的药理作用，为临床应用提供实验理论依据。但由于岩柏草含有复杂的化学成分，有必要对保肝作用的有效成分、有效部位做进一步研究[6] ......
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