核桃花中总黄酮的含量测定研究(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
3.3 线性关系的考察
分别精密量取芦丁对照品溶液0.4mL、1.2mL、2.0mL、2.8mL、3.6mL，置10mL容量瓶中，加入5%的NaNO2溶液0.4mL，摇匀，放置6min。再加入10%的Al(NO3)3溶液0.4mL，摇匀，放置6min。最后加入4%的NaOH溶液2mL，分别用50%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，放置15min。在510nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制吸收曲线，结果见表1和图3。
表1线性范围考察结果
对照品(μg/mL)8.826.44461.679.2
吸光度0.0800.3250.5030.7100.922
由上表所得数据进行回归分析，得回归方程为：Y=0.0118X-0.0092，相关系数为r=0.9990。
图3芦丁标准曲线
通过回归方程和标准曲线可以看出，芦丁对照品浓度在8.8～79.2μg/mL范围内呈良好的线性关系。
3.4 稳定性实验
分别精密量取对照品溶液2mL，供试品溶液1mL，置5mL容量瓶中，按照“3.3”项方法显色，分别在放置0、5、10、15、20、25min后检测，在510nm波长处测定吸光度并计算其RSD值，结果见表2。
表2稳定性实验结果
t/min0510152025平均值RSD%
对照品吸光度0.4500.4500.4500.4400.4400.4400.4451.23
供试品吸光度0.4820.4820.4820.4750.4700.4690.4681.15
实验结果表明，对照品溶液与供试品溶液显色后均在25min内稳定。
3.5 精密度实验
精密量取对照品溶液1mL，共6份，置5mL容量瓶中，按照“3.3”项方法显色，在510nm波长处测定吸光度并计算其RSD值，结果见表3。
表3精密度实验结果
样品编号123456平均值RSD%
吸光度0.4820.4800.4760.4730.4840.4870.4790.933
实验结果表明，该方法有较好的精密度。
3.6 重复性实验
取核桃花约0.2500g，精密称定，共取6份，按照“3.2.1”项方法制备供试品溶液。精密量取供试品溶液1mL，置5mL容量瓶中，并依照“3.3”项方法显色，在510nm波长处测定吸光度并计算其RSD值，结果见表4。
表4重复性实验结果
样品编号123456平均值RSD%
吸光度0.487 0.4730.4770.4690.4910.4840.4791. 94
实验结果表明，该方法重复性较好。
3.7 加样回收率实验
取已知总黄酮含量(8.33%)的核桃花约0.1250g，精密称定，共取6份，分别精密加入低、中、高不同浓度的芦丁对照品，按照“3.2.1”项方法制备供试品溶液。精密量取供试品溶液1mL，置5mL容量瓶中，并依照“3.3”项方法显色，在510nm波长处测定吸光度并计算其RSD值，结果见表5。
实验结果表明，该方法加样回收率良好。
4 结 果
总黄酮含量测定方法的考察一直是总黄酮研究的一个热点问题，对没有相应黄酮对照品的植物总黄酮的含量测定，通常以芦丁为对照品，显色后用紫外分光光度法测定其含量。中华人民共和国药典中测定槐米中芦丁的含量，即用NaNO2-Al(NO3)3- NaOH的显色方法，是测定总黄酮最常用的方法[3]。
目前有关核桃花总黄酮的含量测定的研究尚未见报道 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2168kb)。