加碱提取何首乌中大黄素工艺的探讨
参见附件(248kb)。
【摘要】目的：筛选提取何首乌中大黄素的最佳工艺条件。方法：根据何首乌中大黄素的理化性质，考察乙醇溶剂量、提取时间、加入碱量3个因素，进行正交优化试验。结果：用7倍量80%乙醇和占溶液体积12.5%的0.5%氢氧化钠溶液回流提取0.5小时的提取方法可以获得较高的大黄素提取率。结论：提取时间、加入碱量对何首乌中大黄素的提取效率有较大影响。
【关键词】何首乌；大黄素；紫外分光光度法；正交试验；加入碱(氢氧化钠)
文章编号：1009-5519(2007)07-0974-02 中图分类号：R5 文献标识码：A
何首乌为蓼科植物何首乌(Polygonum multiflorum Thumb.)的干燥块根。气微，味微苦而甘涩。具有解毒、消痈、润肠通便之功效。用于瘰疬疮痈、风疹瘙痒、肠燥便秘、高血脂。何首乌中的主要有效部位之一为蒽醌衍生物——大黄素。大黄素属羟基蒽醌的衍生物，能溶于乙醇，稍溶于乙醚、氯仿、苯，溶于苛性碱水溶液、碳酸钠溶液或氨溶液，且乙醇能除去无效成分和杂质。李义平等[1]通过筛选多种提取溶剂证明，在80%乙醇的提取体系中，大黄素的提取率较为理想。
大黄素在植物体内与钠、钾、钙、镁等金属离子结合，以盐的形式存在,本试验考虑加碱进行提取，看能否提高大黄素的提取率。所以本试验在传统溶剂乙醇溶液提取的基础上加碱，以乙醇溶剂量、提取时间、加入碱量三因素对大黄素提取进行正交优化，筛选最佳工艺条件。
1 仪器与试剂
紫外-可见-近红外扫描分光光度计(UV-3101PC，日本岛津)；752N型紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；FA1104型电子分析天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)。
大黄素对照品(中国药品生物制品检定所)；何首乌药材(购自广东省湛江市药材公司)；无水乙醇为分析纯(广州化学试剂厂)，甲醇为一级色谱纯(天津市四友生物医学技术有限公司)，氢氧化钠为分析纯(广东.汕头西陇化工厂)；蒸馏水(实验室自制)。
2 方法
2.1 对照品溶液制备：取大黄素标准品约10 mg，精密称定，置于100 ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀。精密量取上述溶液5 ml,稀释到50 ml作为对照品溶液。
2.2 检测波长:大黄素对照品溶液用紫外-可见-近红外扫描分光光度计在200～400 nm范围内扫描。在288 nm处的响应值最大，故选择288 nm为检测波长。
2.3 标准曲线:分别将标准品溶液稀释为原液的0.75、0.5、0.325、0.25、0.125倍，于288 nm波长处分别测定其吸光度见表1。以吸光度为横坐标，大黄素含量为纵坐标得标准曲线方程为Y＝0.473618X+0.022971，r=0.9961。线性关系良好。
2.4 试验方法
2.4.1 醇提试验：取何首乌细粉0.5 g，重复李义平等乙醇提取最佳工艺：用7倍量80%乙醇加热回流2次,每次2小时。测得大黄素含量为13.7017 mg/g。
2.4.2 正交试验：取何首乌细粉9份，每份1 g。采用3因素3水平正交试验法对加氢氧化钠溶液量、提取溶剂(80%乙醇溶液)量、提取时间进行试验研究(见表2)。用紫外分光光度法测定溶液中大黄素含量，计算其提取率(见表3)。
3 结果
将正交试验结果(见表3)进行极差分析和方差分析结果见表4、5。以大黄素含量(mg/g)为考察指标，由表4中极差R值大小显示大黄素各因素对何首乌中大黄素提取的影响程度不同，作用主次为： A→C→B，其中A、C因素对何首乌中大黄素提取有显著性影响，B因素对何首乌中大黄素提取无显著性影响。正交设计中加氢氧化钠后测得大黄素含量绝大部分大于醇提试验大黄素的含量13.701 7 mg/g。实验证明，在乙醇提取基础上加入少量氢氧化钠溶液可以提高大黄素的提取率。综合分析结果，最佳工艺为A1B1C1，即用7倍量80%乙醇溶液和占溶液体积12.5%的0.5%氢氧化钠溶液回流提取0.5小时。
4 讨论
4.1 由于大黄素是一种羟基蒽醌的衍生物，在植物体内与钠、钾、钙、镁等金属离子结合，以盐的形式存在，而碱溶液可以直接抽提含有羟基和羧基的蒽醌类化合物，所以我们加入少量不同浓度的碱溶液进行优化提取。实验数据表明,加碱后大黄素的提取率明显提高 ......
【摘要】目的：筛选提取何首乌中大黄素的最佳工艺条件。方法：根据何首乌中大黄素的理化性质，考察乙醇溶剂量、提取时间、加入碱量3个因素，进行正交优化试验。结果：用7倍量80%乙醇和占溶液体积12.5%的0.5%氢氧化钠溶液回流提取0.5小时的提取方法可以获得较高的大黄素提取率。结论：提取时间、加入碱量对何首乌中大黄素的提取效率有较大影响。
【关键词】何首乌；大黄素；紫外分光光度法；正交试验；加入碱(氢氧化钠)
文章编号：1009-5519(2007)07-0974-02 中图分类号：R5 文献标识码：A
何首乌为蓼科植物何首乌(Polygonum multiflorum Thumb.)的干燥块根。气微，味微苦而甘涩。具有解毒、消痈、润肠通便之功效。用于瘰疬疮痈、风疹瘙痒、肠燥便秘、高血脂。何首乌中的主要有效部位之一为蒽醌衍生物——大黄素。大黄素属羟基蒽醌的衍生物，能溶于乙醇，稍溶于乙醚、氯仿、苯，溶于苛性碱水溶液、碳酸钠溶液或氨溶液，且乙醇能除去无效成分和杂质。李义平等[1]通过筛选多种提取溶剂证明，在80%乙醇的提取体系中，大黄素的提取率较为理想。
大黄素在植物体内与钠、钾、钙、镁等金属离子结合，以盐的形式存在,本试验考虑加碱进行提取，看能否提高大黄素的提取率。所以本试验在传统溶剂乙醇溶液提取的基础上加碱，以乙醇溶剂量、提取时间、加入碱量三因素对大黄素提取进行正交优化，筛选最佳工艺条件。
1 仪器与试剂
紫外-可见-近红外扫描分光光度计(UV-3101PC，日本岛津)；752N型紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；FA1104型电子分析天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)。
大黄素对照品(中国药品生物制品检定所)；何首乌药材(购自广东省湛江市药材公司)；无水乙醇为分析纯(广州化学试剂厂)，甲醇为一级色谱纯(天津市四友生物医学技术有限公司)，氢氧化钠为分析纯(广东.汕头西陇化工厂)；蒸馏水(实验室自制)。
2 方法
2.1 对照品溶液制备：取大黄素标准品约10 mg，精密称定，置于100 ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀。精密量取上述溶液5 ml,稀释到50 ml作为对照品溶液。
2.2 检测波长:大黄素对照品溶液用紫外-可见-近红外扫描分光光度计在200～400 nm范围内扫描。在288 nm处的响应值最大，故选择288 nm为检测波长。
2.3 标准曲线:分别将标准品溶液稀释为原液的0.75、0.5、0.325、0.25、0.125倍，于288 nm波长处分别测定其吸光度见表1。以吸光度为横坐标，大黄素含量为纵坐标得标准曲线方程为Y＝0.473618X+0.022971，r=0.9961。线性关系良好。
2.4 试验方法
2.4.1 醇提试验：取何首乌细粉0.5 g，重复李义平等乙醇提取最佳工艺：用7倍量80%乙醇加热回流2次,每次2小时。测得大黄素含量为13.7017 mg/g。
2.4.2 正交试验：取何首乌细粉9份，每份1 g。采用3因素3水平正交试验法对加氢氧化钠溶液量、提取溶剂(80%乙醇溶液)量、提取时间进行试验研究(见表2)。用紫外分光光度法测定溶液中大黄素含量，计算其提取率(见表3)。
3 结果
将正交试验结果(见表3)进行极差分析和方差分析结果见表4、5。以大黄素含量(mg/g)为考察指标，由表4中极差R值大小显示大黄素各因素对何首乌中大黄素提取的影响程度不同，作用主次为： A→C→B，其中A、C因素对何首乌中大黄素提取有显著性影响，B因素对何首乌中大黄素提取无显著性影响。正交设计中加氢氧化钠后测得大黄素含量绝大部分大于醇提试验大黄素的含量13.701 7 mg/g。实验证明，在乙醇提取基础上加入少量氢氧化钠溶液可以提高大黄素的提取率。综合分析结果，最佳工艺为A1B1C1，即用7倍量80%乙醇溶液和占溶液体积12.5%的0.5%氢氧化钠溶液回流提取0.5小时。
4 讨论
4.1 由于大黄素是一种羟基蒽醌的衍生物，在植物体内与钠、钾、钙、镁等金属离子结合，以盐的形式存在，而碱溶液可以直接抽提含有羟基和羧基的蒽醌类化合物，所以我们加入少量不同浓度的碱溶液进行优化提取。实验数据表明,加碱后大黄素的提取率明显提高 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(248kb)。