酶联免疫吸附试验一步法检测ＨＢｓＡｇ有关问题探讨
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文章编号：1009-5519(2007)09-1384-01 中图分类号：R446 文献标识码：B
酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测HBsAg常用方法，根据反应模式可分为一步法和二分法。一步法是将待测样品和酶标记抗体同时加入到反应孔中进行反应，从而达到简便、快速的目的；两步法是先将样品加入到反应孔中，待反应结束后再加入酶标记抗体，从而使待测样品的“捕获反应”和酶标记抗体的“酶联反应”分开进行，因而反应更加稳定、重复性也更好，但反应时间比一步法长。目前国内用于检测HBsAg的试剂盒多为ELISA一步法，在实际工作中，某些因素使一步法检测结果受到影响，若不注意，将出现假阳性或假阴性。现对操作中出现的问题进行探讨，旨在提高HBsAg检测结果的准确性。
1 试剂
按说明书保存试剂盒，操作时从冰箱取出，放置于37℃环境恒温15分钟，使试剂温度恢复至37℃后再进行，因一步法反应时间为30分钟，试剂从冰箱取出恢复到反应温度需要时间，如果按常规放置至室温，反应时间达不到要求，抗原抗体反应不完全而可能出现假阴性。
2 血液中某些成分的影响
红细胞：当血清中混有一定浓度的红细胞时，由于红细胞表面有大量的活性物质，容易与反应孔发生非特异性吸附，黏附于孔壁不易被洗脱，加入底物显色后出现假阳性。纤维蛋白抽血后如果检测过早 ......
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