健康受试者醋酸环丙孕酮片的生物等效性测定(2)
1.4.2 样品抽提:血清样本0.5~1.0 ml加等体积NaOH(0.25N,1/1:v/v),充分混匀,加5 ml乙酸乙脂充分混匀5分钟,4000 r/min离心5分钟,收集有机相,40℃蒸发,氮气吹干,残留物用流动相溶解,并定溶至0.3~1.0 ml,待测。
1.4.3 色谱条件:C18反相柱(Inertsil ODS),流动相为80∶20(v∶v)的乙腈,流速为1 ml/min,检测波长为283 nm,进样量50 ?滋l。
1.4.4 标准曲线及质量控制:称取一定量的醋酸环丙孕酮,用流动相配制成标准储备液,然后稀释成标准系列浓度(0.075、0.125、0.25、0.5、1.0 ?滋g/ml),50 ?滋l进样测定峰面积,以浓度对峰面积作图绘制标准曲线(Sigma-Plus软件)。
样品测定时,控制稀释倍数,使其浓度落在标准曲线范围内 ......
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