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编号:11607460
贴壁细胞培养过程中支原体污染的几种救治方案疗效比较研究
http://www.100md.com 2008年4月15日 《现代医药卫生》 2008年第8期
贴壁细胞培养过程中支原体污染的几种救治方案疗效比较研究

     文章编号:1009-5519(2008)08-1221-02 中图分类号:R446 文献标识码:B

    支原体是细胞培养中最常见、不易被察觉和干扰实验结果的污染物,约有30.3%~50.5%的细胞培养物中有支原体污染。培养细胞中支原体污染的来源包括:所使用的动物来源的一些产品如血清或已被支原体污染的细胞株系。细胞培养上清液中支原体的浓度可达107个/ml,而培养的细胞看起来很正常,在肉眼观察或普通光学显微镜下观察,受污染的细胞可无明显变化。由于竞争营养及支原体有毒的代谢产物,支原体污染可显著影响培养细胞的生理活性,使研究结果的真实性和可靠性大大下降。本实验拟使用4种方案处理体外培养的支原体污染贴壁细胞,并就其疗效进行比较,现报道如下。

    1 材料

    1.1 试剂及动物:(高糖)DMEM培养基:Giboco;胰蛋白酶:Gi-boco;DNA荧光法染色检测支原体试剂盒:Epitomics;BM-Cy-din:Roche;Bab/c裸鼠:北京动物所。

    1.2 细胞的来源和培养:人乳腺癌MCF-7细胞株,购自四川大学华西医学中心分子遗传学研究室。体外于不加抗生素的内含10%小牛血清的DMEM培养基,37℃、5%CO2恒温培养箱中培养。

    2 方法

    实验分为试验组、阳性对照组和阴性对照组。试验组为支原体污染且用不同方法作用的细胞 ......

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