胰岛素对大鼠肝细胞损伤的保护作用
【摘要】目的:探讨胰岛素对大鼠肝细胞损伤是否具有保护作用。方法:胶原酶原位灌流分离大鼠肝细胞并原代培养,分别用脂多糖(LPS)及胰岛素处理肝细胞,12 h后检测肝细胞损伤及存活率。结果:LPS可引起肝细胞损伤,使丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)增高;胰岛素可减轻上述肝细胞损伤(ALT活性降低55.5%、AST活性降低24.4%,P95%方可用于实验。调整细胞密度为2.0×105/L,接种于24孔(每孔1 ml) 及96孔 (每孔0.1 ml)培养板内,37 ℃、50 ml/L CO2的细胞培养箱中培养24 h后换液。1.2.1 实验分组:取原代培养24 h的肝细胞分为5组,分别用以下培养液:(1)Normal:无血清DMEM培养液;(2)LPS:含20 μg/L LPS的无血清 DMEM培养液;(3)LPS+10-9 Insulin:含10-9 mol/L胰岛素和20 μg/L LPS的无血清DMEM培养液;(4)LPS+10-8 Insulin:含10-8 mol/L胰岛素和20 μg/L LPS的无血清DMEM培养液;(5)LPS+10-7 Insulin:含10-7 mol/L胰岛素和20 μg/L LPS的无血清DMEM培养液 ......
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