分子生物学实验室有毒物质的危害及管理
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文章编号：1009-5519(2009)10-1588-02
中图分类号：R19
文献标识码：B
目前，分子生物学飞速发展，分子生物学相关的理论和技术已深入到生命科学的各个领域，一些常用的技术，如基因组DNA的分离纯化，质粒DNA的抽提及纯化，RNA的提取，PCR扩增，Southern blot等成为分子生物学研究的强有力工具，为分子生物学的发展起了巨大的推动作用，然后，这些实验操作技术都涉及到氯仿、DEPC、同位素等有毒有害或具放射性的物质，对环境和人身安全也造成巨大的威胁。因此，弄清这些有害有毒物质的作用，加强实验室安全管理，建立良好的制度和处理，保证分子生物学实验室成为真正的科研阵地。
1 完善实验室安全制度
分子生物学实验室是教学和科研的重要场所，化学试剂种类繁多且成分复杂。如果处理不好、管理不善，就会对实验人员和环境造成危害。因此，应加强分子生物学实验室的安全管理。对不同的化学品进行分类专人专管，对易燃、剧毒物品应有领用管理办法，签定安全责任书，确保做到责任到人。同时，加强对危险化学品的购买、运输、储存和使用的监督管理，使实验室的安全工作做到规范化、制度化和标准化。此外，分子生物学实验中。经常要用到整只动物或动物的部分组织器官进行实验，因此，建立健全实验动物的临时饲喂、管理和死后处理制度，对动物的食物、排泄物及毛发及时进行处理，对动物的抓咬、逃逸等也应有严格的管理规定和制度。
2 建立一支高水平的师资队伍
提高实验队伍的业务素质。不仅让实验员会操作各种仪器，还必须熟悉实验室各种试剂的性能、毒性、防护等。加强对实验员人员的管理和安全教育。使实验人员养成良好的工作和生活习惯。如进入细胞培养宣前更衣、戴帽、换拖鞋；进入同位素室先穿铅衣，戴上一次性手套，再用盖革计数器将可能污染的物品全部检查一遍，确保没有放射源的情况下开始动手实验；实验中有氯仿、四氯化碳等有毒的挥发性气体，必须在通风柜里进行操作等。实验内容设计要尽量选择无公害、低毒品做实验，实验残液、残渣要少、要可回收，以减少污染，保护环境。
3 实验室合理设计和布局
实验室的布局是实验室安全的一个重要环节。因此，对实验室应进行合理布局，划分专用的功能区，规定人员物品行走路线、进、出通道控制等。同时，确保实验动物不能逃逸，非实验室动物(野鼠、昆虫等)不能进入，实验室内仪器的摆放要既合理又方便操作。对实验室废液应根据其性质选择适宜的有明显标记的容器和存放地点，密闭保存。放射性同位素室布局在人员活动较少、较偏的房间内，并由专人负责管理。核酸电泳时要用到溴化乙锭(Ethidium Bromide，EB)进行染色，因此，电泳室要布局在相对偏僻且方便的单间内。进行电泳操作时，要防止EB扩散，一只手戴一次性手套，接触EB区，另一只手接触非EB的器皿如微波炉、电泳仪、冰箱等。
4 各种废物的处理
4.1实验耗材和生物材料的处理：实验中废弃的吸头、Epp-endorf管、手套、试管等定期灭菌后，深埋；废弃的玻璃制品和金属物品应使用专用容器分类收集，统一回收处理。实验废弃的生物活性实验材料特别是细胞和微生物必须及时灭活和消毒处理，实验动物尸体或器官需及时进行妥善处置，按要求消毒，统一送有关部门集中焚烧处理。实验内容设计过程中要尽量选择无公害、低毒性药品做实验，实验残液、残渣要少，要便于回收，以减少污染，保护环境。
4.2放射性物质的处理：放射性同位素技术具有灵敏、简便和廉价等优点，在分子生物学实验室应用普遍，但由于放射性同位素的辐射会给人体造成损伤，如果使用不当或操作不规范，会造成环境污染，甚至损伤人员。在进行同位素操作时一定要注意个人防护，包括使用隔离、专用衣帽手套及防护背心、挡板等。对放射性同位素的污染进行安全性教育，实行责任到人的做法，对放射性物质统一保管、集中存放、集中处理的做法。在定购同位素时，根据需要量进行订购。α-31p半衰期为14.5天，在southern blotting应用较广，是危害较大的放射性物质。DNA杂交时，在探针标记、洗膜等几个阶段都涉及同位素。对含α-31p固体废物，放入铁皮箱10个半衰期(约半年)后埋到指定的地点：对于含α-31p浓度较高的液体废物(如首次洗膜液)，在厚实的朔料桶放置8个半衰期后倒入专用的下水道；含α-31p浓度较低的液体废物(如二、三次洗膜液)，则直接倒入专用的下水道。
4.3常见的有毒物质的处理：溴化乙锭、Trizol、丙烯酰氨、DEPC、甲酰氨等毒性高、环境危害大的物质，分类收集后统一处理。
4.3.1 EB(Ethidiunl bromide，溴化乙锭)：EB是一种强烈诱变剂并有中度毒性，应戴手套操作，对于含有EB的溶液也不应直接倒下水道，用后妥善净化处理：EB含量大干0.5μg/ml溶液先用水将EB浓度稀释至0.5μg/ml以下，每100ml溶液加入100mg活性碳。不时轻轻摇荡混匀，室温放置1小时，滤纸过滤将活性碳与滤纸密封在塑料袋中作为有害废物丢弃。或用专用一次性染料清除袋(Gene有限公司)吸附过夜，再焚烧袋子即可。EB接触物，如抹布、枪头等埋入地下。
4.3.2 Trizol：提取组织和细胞RNA的一种重要试剂，在提取RNA时一定要在通风进行。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。
4.3.3 DEPC(Diethylprocarbonate，二乙基焦碳酸酯)：RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时戴口罩。在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通过废液道排泄。
4.3.4 CHCl3(ChIoroform，氯仿)：常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废液收集后埋入地下。
4.3.5 Acrylamide(丙烯酰胺)：DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道。
4.3.6 DMSO(二甲亚砜)：是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细胞的冻存液和配制AS ......
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