蔡国徽，韩云竹，唐斌，宋鸿

    (遵义医学院微生物学教研室，贵州遵义563099)

    胶原三维培养下卵巢癌细胞生物学性状研究

    蔡国徽，韩云竹，唐斌，宋鸿

    (遵义医学院微生物学教研室，贵州遵义563099)

    目的建立卵巢癌HO-8910PM细胞胶原Ⅰ三维培养模型，对胶原Ⅰ基质中卵巢癌HO-8910PM细胞的形态、活力及功能进行研究，为体外卵巢癌的研究提供参考。方法透射电镜表征胶原Ⅰ结构特点，以胶原Ⅰ为支架材料，建立卵巢癌细胞体外三维培养模型；倒置显微镜观察卵巢癌细胞生长形态及增殖情况；钙黄绿素-AM染色观察胶原Ⅰ基质中卵巢癌细胞的活力；ELISA检测二维培养及三维培养中卵巢癌细胞血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的分泌。结果透射电镜下可见胶原Ⅰ呈交联网络状结构，胶原Ⅰ基质中卵巢癌细胞集聚成不规则团状，细胞在胶原Ⅰ中的活力较好，细胞与基质具有良好的生物相容性；与二维培养细胞比较，三维培养体系中VEGF-A、EGF和IGF-1的分泌量均较高，差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论胶原Ⅰ具有良好的结构与性能，适宜于卵巢癌细胞体外三维培养，并能较好地维持卵巢癌细胞的形态和功能。

    卵巢肿瘤；培养技术；胶原Ⅰ型；血管内皮生长因子类；表皮生长因子

    在全球范围内，卵巢癌的发病率在女性恶性肿瘤中占3%～4%，但病死率却居女性生殖系统恶性肿瘤的第1位[1-2]。因此，研究卵巢癌发生发展机制，对于提高卵巢癌患者临床治疗效果尤为重要。目前，卵巢癌的体外研究大多采用二维细胞培养模式，但由于培养装置常为玻璃或塑料的二维平面，无法模拟具有空间结构的细胞外基质(ECM)与细胞之间的相互作用。有研究发现，二维细胞培养使细胞处于二维平面上，常导致细胞部分生物学特性的改变，甚至一些关键的细胞表型及功能缺失[3]。因此，二维培养模型中的细胞生物学过程并不能反映细胞在体内的真实行为，更无法体现三维微环境中多种信号对细胞的调节作用。动物模型虽可以模拟体内肿瘤细胞生长的微环境，但难以进行大规模的分子水平研究。现有研究表明，三维培养的肺癌细胞间相互连接紧密，可较好地实现细胞间信号传导，细胞在分化程度、超微结构等方面也与体内细胞更为接近[4]。三维细胞培养体系弥补了二维培养与动物实验的不足，将细胞、人造基质骨架及各种因子共培养，不仅为肿瘤细胞生长提供了类似于体内ECM的支架或基质结构，还可实现细胞间、细胞与ECM间的相互作用，也更能反映细胞与细胞间质间的作用机制，有利于从分子水平对肿瘤相关机制进行研究 ......