苦参提取液对肠致病性大肠杆菌感染小鼠的疗效研究
生药,菌液,1材料与方法,2结果,3讨论
吴蕊,余新超(安徽理工大学医学院,安徽淮南232001)
苦参提取液对肠致病性大肠杆菌感染小鼠的疗效研究
吴蕊,余新超
(安徽理工大学医学院,安徽淮南232001)
目的研究苦参提取液对肠致病性大肠杆菌标准株O10(EPECO10)感染小鼠肠道的保护作用。方法将50只小鼠平均分为五组,每组10只,分别为模型组、治疗组Ⅰ(高浓度,含生药浓度为0.500 g/mL)、治疗组Ⅱ(中浓度,含生药浓度为0.250 g/mL)、治疗组Ⅲ(低浓度,含生药浓度为0.125 g/mL)及空白组。空白组小鼠腹腔注射生理盐水,其余四组小鼠腹腔注射EPECO10菌液建立腹泻模型,治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ给予不同浓度的苦参灌胃,模型组和空白组用生理盐水灌胃。比较五组小鼠腹泻指数、炎症评分及肠道中超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果模型组小鼠的腹泻指数、炎症评分及肠道SOD的表达与治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论苦参提取液可以明显减轻小鼠的腹泻症状,改善其肠道的病理表现,具有良好的治疗效果。
肠致病性大肠杆菌;腹泻;动物实验;超氧化物歧化酶;苦参
肠致病性大肠杆菌(EPEC)是造成小儿腹泻常见的条件致病菌,感染后的儿童(尤其是2岁以下的婴幼儿)可以出现持续性腹泻、腹痛,严重者可出现脱水而导致死亡。目前,临床上治疗由该菌引起的腹泻主要采用抗生素,其初期使用效果尚好,长期使用存在多种不良反应。为进一步探究中药对该病的治疗效果,本研究采用前期体外实验筛选出的对EPEC抑制作用较好的苦参,通过腹腔注射建立小鼠腹泻模型,观察该药在小鼠体内对EPEC的保护作用。
1 材料与方法
1.1 材料清洁级BALB/C小鼠50只(购自安徽医科大学实验动物中心),雌雄各半。致病性大肠杆菌标准株O10(EPECO10,购自北京北纳创联生物技术研究院),苦参(购自淮南恒康大药房),超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)。
1.2 方法
1.2.1 实验菌液的制备将EPECO10经复壮培养后,增菌培养2~3代,挑选单个菌落接种于LB(溶菌肉汤)培养基中,置于37℃培养箱中培养18~24 h。采用平皿表面活菌计数法确定菌液浓度为5×109cfu/mL。
1.2.2 苦参液的制备称取苦参50 g,清洗、烘干、过筛、粉碎(程度以20目筛为宜),加水500 mL,将中药浸泡在水中,加热至沸腾后,改用文火再加热30 min,趁热将滤液滤出,再将滤渣加8倍水 ......
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