廖应英，孙泽群，李彩丽，查火龙(.湖北中医药大学，湖北武汉430065；.十堰市人民医院消化内科，湖北44000)

    食管癌目前严重威胁着人们的身体健康，是消化系统常见的恶性肿瘤之一。有研究表明，槲皮素(quercetion)是从槲皮中提取的一种5-羟基黄酮类化合物，为无毒中药，具有多种生物学活性[1-3]。槲皮素作用广泛，不仅能够抑制多种肿瘤细胞的增殖及促进肿瘤细胞凋亡，与其他抗肿瘤药物联用后可增强药物对肿瘤细胞的敏感性，而且在扩张冠状动脉、抗氧化、抗血小板聚集、镇痛等方面有多种药理作用，这种化合物在低浓度时可以刺激人体细胞扩散，在高浓度、凋亡情况下能消除感染或异常细胞，可作为一种潜在的抗癌药物，临床应用广泛。槲皮素可以干扰细胞酶、受体、转运蛋白和信号系统[4]，但其抑制肿瘤细胞增殖及促进凋亡的分子机制目前仍未研究清楚。本研究通过槲皮素对人食管癌E-ca109细胞增殖与凋亡的影响，为临床抗肿瘤治疗提供帮助，为进一步探讨其抗肿瘤的分子机制提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂 槲皮素粉剂购于Sigma公司；RPMI1640培养液、胰蛋白酶购自Gibco公司；新生牛血清购自四季青生物公司。

    1.1.2 槲皮素的配制 取槲皮素粉剂18 mg，溶解于1 mL二甲基亚砜(DMSO)中，配成母液，使用含10%新生牛血清RPMI1640培养液稀释，使DMSO终浓度小于1/1000，现配现用。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞株及体外培养 人食管癌Eca109细胞(湖北省十堰市人民医院食管肿瘤研究所提供)；体外培养Eca109细胞，将其接种在RPMI1640培养基中(含10%左右新生牛血清)，于37℃、5%CO2培养箱中培养，每天观察细胞形态及数目，每隔2～3 d用0.25%胰蛋白酶消化细胞后传代1次，连续传3代后，取对数生长期的细胞。

    1.2.2 噻唑蓝(MTT)法检测槲皮素对Eca109细胞增殖的影响 将传3代后的Eca109细胞用胰蛋白酶消化，制成细胞悬液，使用标准的细胞计数板计数，调整细胞浓度为1×104mL-1到96孔板上 ......