周思敏，唐娴，邓鹏，董兰岚，何元，贾燕，白群华，肖虹

    (重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心，重庆400016)

    铬还原酶ChrT工程菌的遗传稳定性研究*

    周思敏，唐娴#，邓鹏，董兰岚，何元，贾燕，白群华，肖虹△

    (重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心，重庆400016)

    目的研究重组铬还原酶ChrT工程菌的遗传稳定性。方法将ChrT工程菌传至50代，每10代进行遗传稳定性相关检测。同时设置不加菌液的对照组作为空白对照组。结果各代ChrT工程菌的菌落生长形态、革兰染色、生化反应结果与原代菌株一致；各代ChrT工程菌质粒稳定，ChrT基因序列未见突变或丢失；经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后，各代ChrT工程菌的目的蛋白表达水平与原代无明显差别；在含六价铬[Cr(Ⅵ)]50 mg/L的LB液体培养基中，与空白对照组比较，48 h后各代ChrT工程菌培养基中Cr(Ⅵ)的质量浓度明显减少，差异均有统计学意义(P<0.05)；各代ChrT工程菌间除Cr(Ⅵ)能力比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论ChrT工程菌生物学特性稳定，可用于治理环境中Cr(Ⅵ)的污染。

    铬；大肠杆菌；基因表达；生物转化；铬还原酶；工程菌；遗传稳定性

    铬是一种非常重要的金属元素，广泛地应用于冶金、制革、颜料、染料、香料、造币、医药等制造行业，具有巨大的经济价值[1]。随着工业化进程的不断推进，中国已成为世界铬盐生产大国，每年的产铬总量超过30万吨[2]；然而，含铬废水未经处理直接排放及铬渣的任意堆积，对水体和土壤等环境都造成了严重污染[3-4]。环境中常见的铬其存在形式有三价铬[Cr(Ⅲ)]和六价铬[Cr(Ⅵ)]2种[4-6]；Cr(Ⅵ)由于有极高的水溶性，其毒性远大于水溶性低的Cr(Ⅲ)，是国际公认的致癌金属物之一[2，7]。Cr(Ⅵ)可经皮肤、呼吸和饮食进入人类机体，对皮肤、呼吸道和消化道有刺激和致癌作用[8]。因此，治理环境中的Cr(Ⅵ)污染十分必要。

    目前，国内外处理环境中的Cr(Ⅵ)污染大多采用理化法，如化学还原法、离子交换法、吸附法、膜分离法等[9-10]，但理化法存在消耗原材料多、产生大量淤泥、处理费用高、容易产生新污染等缺点[11]。近年发展起来的生物治理方式可利用微生物的吸附使环境中Cr(Ⅵ)的浓度降低，或利用微生物的铬还原酶使Cr(Ⅵ)还原为Cr(Ⅲ)，从而达到Cr(Ⅵ)解毒的目的[12-14] ......