金晓琳，金浩龙，侯 瑞，熊 坤，陈志瑾△

    (1.第三军医大学微生物学教研室，重庆400038；2.第三军医大学新桥医院感控科，重庆400037；3.第三军医大学免疫学教研室，重庆400038)

    ·临床研究·

    碘液在芽孢染色中的应用研究*

    金晓琳1，金浩龙2，侯 瑞3，熊 坤1，陈志瑾1△

    (1.第三军医大学微生物学教研室，重庆400038；2.第三军医大学新桥医院感控科，重庆400037；3.第三军医大学免疫学教研室，重庆400038)

    目的 探寻一种满意的芽孢染色方法，同时该方法能克服染料加温后挥发给实验操作人员带来的身体伤害。方法 以碘液为媒染剂，用冷染方法替代传统芽孢加温染色，然后进行细菌涂片、干燥、固定、染色。初染液为石炭酸复红5 min，碘液媒染1 min，95%乙醇脱色5 s，碱性美兰复染1 min。比较石炭酸复红染色后加碘液、石炭酸复红染色不加碘液、石炭酸复红加温染色不加碘液的染色效果。结果 石炭酸复红染色后加碘液与石炭酸复红加温染色不加碘液的染色效果相同，石炭酸复红染色不加碘液也能看出芽孢，但不明显。结论 用碘液助染可获得满意的芽孢染色结果，且用该法可减少石炭酸挥发给实验操作人员带来的危害。

    碘； 染色与标记； 芽孢杆菌属/化学； 苯酚

    经典的芽孢染色法为Schaeffer-Fulton方法(微生物学家Alice B.Schaeffer和Macdonald Fulton在20世纪30年代建立)和Wirtz-Conklin方法(Robert Wirtz和Marie E.Conklin是20世纪早期的细菌学家)，即采用石碳酸(苯酚)复红染液或孔雀绿进行芽孢染色，在加温条件下染5 min才能将芽孢染上颜色，然后水洗，用碱性美兰、番红或沙黄复染。这种加温助染的方法称为热染法。但众所周知，石碳酸是苯酚，具有明显挥发性，在加温条件下促进了石碳酸的挥发，对人体皮肤、黏膜具有明显刺激。人们在使用石碳酸加温促染时会感觉到眼睛和鼻部受到的刺激。再者含苯环的芳烃类物质被认为具有致癌性，孔雀绿也具有高毒素、高残留、致癌、致畸、致突变等作用。本研究建立了一种应用碘液助染，避免应用加热助染的芽孢冷染法，芽孢染色效果好 ......