侯福涛，黄忠诚，陈子华

    (1.湖南省人民医院胃肠结直肠肛门外科，长沙410005；2.中南大学湘雅医院胃肠外科，湖南长沙410008)

    沉默EphA2表达对胃癌AGS细胞上皮-间质转化的影响*

    侯福涛1，黄忠诚1，陈子华2△

    (1.湖南省人民医院胃肠结直肠肛门外科，长沙410005；2.中南大学湘雅医院胃肠外科，湖南长沙410008)

    目的探讨EphA2基因表达沉默对胃癌AGS细胞上皮-间质转化的影响机制。方法将对数生长期的胃癌AGS细胞接种于6孔板并分为EphA2 siRNA组、阴性对照组和空白对照组。采用EphA2 siRNA转染胃癌AGS细胞，采用实时定量聚合酶链反应检测转染细胞EphA2的表达，采用相差显微镜观察细胞形态的变化，采用Transwell实验检测转染细胞的侵袭能力，应用蛋白质印迹法检测转染细胞E-cadherin和vimentin蛋白的表达。结果EphA2 siRNA组的EphA2 mRNA相对表达量(0.343±0.035)明显低于阴性对照组(0.950±0.036)和空白对照组(0.997±0.065)，差异均有统计学意义(P<0.05)；EphA2 siRNA组胃癌AGS细胞呈上皮细胞样，阴性对照组和空白对照组细胞呈间质样细胞；EphA2 siRNA组的侵袭细胞数[(29.1±2.6)个]明显少于阴性对照组[(52.2±2.6)个]和空白对照组[(56.2±4.0)个]，差异均有统计学意义(P<0.05)；EphA2 siRNA组E-cadherin蛋白的表达量较阴性对照组和空白对照的E-cadherin蛋白的表达量明显上调，而vimentin蛋白的表达量明显下调，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默AGS细胞EphA2的表达能够抑制胃癌细胞由上皮样细胞向间质样细胞转化，降低AGS细胞的侵袭力，上调上皮性标志物E-cadherin的表达，下调间质性标志物vimentin的表达。

    胃肿瘤； RNA； 基因表达； 蛋白质类； 基因沉默； 上皮细胞； 生物转化

    胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤，为恶性肿瘤第2死因[1]。侵袭转移和术后复发是大多数胃癌患者的主要死亡原因。胃癌浸润、转移涉及多个分子、多条信号转导通路的相互作用和交叉调控。上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)是上皮细胞在特定的生理和病理情况下向间质样细胞转化的现象[2]。具体表现为细胞间黏附连接表达下调，如E-cadherin/catenins复合体 ......