刘振兴，梁金龙，杨雪峰，谢 铭(遵义医学院附属医院胃肠外科，贵州遵义563003)

    结直肠癌(CRC)又称大肠癌，是消化系统常见的恶性肿瘤之一，其发病率居我国消化系统恶性肿瘤的第1位[1]。近年来，随着人口老龄化、饮食习惯及生活方式的改变，CRC的发病率呈逐年上升趋势[2]。其早期症状隐匿、临床发现多属于中晚期、5年生存率低、预后较差，严重威胁着人类的健康[3]。因此，开展CRC的防治研究具有重要意义。CRC的发生与发展是一个极为复杂的过程，为了探讨凋亡抑制蛋白(Survivin)、环氧合酶?2(COX?2)和 P?糖蛋白(P?gp)在 CRC 发病过程中的作用，本研究采用免疫组化方法检测Survivin、COX?2和P?gp在CRC中的表达，并分析其相关性及与临床病理特征的关系，从而为探索CRC新的诊断及防治方法提供实验依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2014年1—12月本院60例临床病理资料完整的CRC患者手术标本，取癌组织和其中20例患者的相应正常黏膜组织(距肿瘤大于10 cm)作为研究对象。60例患者中，男31例，女29例；年龄37～80岁，平均(60.2±12.5)岁；所有患者术前均未进行过放化疗等相关治疗，并排除CRC家族史和CRC术后复发者。60例患者均为腺癌，其中肿瘤直径小于5 cm 34例，≥5 cm 26例；中高分化14例，低分化46例；肿瘤浸润未及浆膜层19例，浸润超过浆膜层41例；有淋巴结转移38例，无淋巴结转移22例；CRC TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期27例，Ⅲ～Ⅳ期33例。所有标本均经甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，4 μm厚连续切片。

    1.2 方法

    1.2.1 试剂与方法 Survivin兔抗人多克隆抗体、COX?2兔抗人多克隆抗体、P?gp兔抗人单克隆抗体、即用型抗鼠/兔通用免疫组化试剂盒均购自上海基因科技有限公司。采用免疫组化方法(GTVision法)检测，实验操作步骤严格按照试剂盒说明书进行，以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照。

    1.2.2 结果判断标准 根据阳性细胞数及阳性信号出现的位置综合判断。Survivin、COX?2阳性染色定位于细胞浆和胞膜的棕黄色颗粒，P?gp阳性染色定位于细胞膜的棕黄色颗粒。细胞着色强度评分：无色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；阳性细胞百分数(以 a表示)评分：0为 0分，0

    百拇医药网 http://www.100md.com/html/paper/1009-5519/2018/02/004.htm

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