淫羊藿苷对大鼠精子质量和精核蛋白作用的影响*
腺嘌呤,活率,1材料与方法,2结果,3讨论
葛 斌,石 燕,王露娟(遵义医学院附属医院生殖中心,贵州遵义563000)雄性生殖系统损害导致的不育症已普遍受到国内外学者关注[1]。精核蛋白(TNBP)是一种与雄性生育能力密切相关的碱性蛋白质,大鼠精核蛋白(RP)含量在反映精子质量方面有着重要意义[2]。淫羊藿苷(ICA)作为一种传统中药,可以抑制生精细胞凋亡、促进睾酮分泌并提高阴茎海绵体鸟苷环磷酸(cGMP)水平。本研究通过观察不同剂量ICA对大鼠精子质量和TNBP表达的影响,探索ICA在治疗不育症中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 雄性SD大鼠80只,体重210~235 g,由第三军医大学附属大坪医院动物中心提供。合格证编号:20150017,饲养于遵义医学院实验动物中心,温度:25℃,湿度:50%。
1.1.2 实验试剂 腺嘌呤由上海远幕生物科技有限公司提供;ICA由南京泽朗生物有限公司提供,纯度大于或等于98%。
1.1.3 分组 将80只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、ICA低剂量组、ICA高剂量组,每组20只。
1.2 方法
1.2.1 建立模型 对照组:蒸馏水3 mL灌胃60 d;模型组:腺嘌呤25 mg/100 g和用蒸馏水3 mL配置后灌胃30 d,再以蒸馏水3 mL灌胃30 d;ICA低剂量组:先用腺嘌呤25 mg/100 g和蒸馏水3 mL配置后灌胃30 d,再以ICA 1.8 g/kg和蒸馏水3 mL配置后灌胃30 d;ICA高剂量组:先用腺嘌呤25 mg/100 g和蒸馏水3mL配置后灌胃30d,再以ICA3.6g/kg和蒸馏水3 mL配置后灌胃30 d。
1.2.2 附睾精液采集和测定 按照文献[3]方法处死大鼠、采集精液,在37℃恒温水浴箱液化10 min后置于精子全自动分析仪上测定。
1.2.3 精子碱性蛋白提取及电泳 按照文献[2]方法提取碱性蛋白,在酸性-尿酸系统中进行电泳分析,结果扫描测量条带数值,总碱性蛋白(TH)/RP比值代表TNBP相应含量。
1.2.4 观察指标 精子密度:每毫升精液的精子数;精子活率:活动精子/精子总数;精子活力:前向运动精子数/精子总数;TNBP相应含量:TH/RP ......
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