吴 斌，许文太，周洪贵(1.川北医学院附属医院妇产科，四川南充637000；.解放军第101医院生殖医学中心，江苏无锡14000)

    体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术也称“试管婴儿”技术，是当今治疗不孕不育的重要方法，精液优化处理作为IVF-ET技术(ART)的关键步骤之一，其目的是分离出精液中的精浆，除去畸形精子、死精子、细胞碎片及其他有害的物质，最终优选出一定数量成熟且具有受精潜能的前线运动精子[1]。目前，临床上常用的优选方法主要包括上游法、密度梯度离心(DGC)法等。本研究比较了DGC法、上游法及DGC结合上游法处理精子的IVF-ET临床结局，旨在为优化IVF-ET技术过程中精子处理方法提供参考。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象 选择解放军第101医院生殖医学中心2013年12月至2016年3月施行IVF-ET助孕的共206个IVF-ET治疗周期的患者，对其临床资料进行回顾性分析。纳入病例的不孕原因包括：盆腔、输卵管因素、免疫性因素、不明原因[2]。排除标准为男方中重度精子少、弱、畸形精子症患者。其中104个周期采用DGC法处理精液，为实验1组；30个周期采用上游法处理精子，为实验2组；72个周期采用DGC法结合上游法处理精子，为实验3组。

    表3 3组患者的IVF-ET结局比较[%(n/n)]

    1.2 方法

    1.2.1 样本采集 女方给予常规促排卵方案[3]，待体内卵泡发育成熟后对其注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)，剂量为 5 000 U 或 10 000 U，35～36 h后，经阴道超声引导下行卵泡穿刺取卵。男方禁欲2～7 d后在女方取卵手术当天通过手淫法取精液[4]，收集于无菌取精杯中，液化后待处理。

    1.2.2 DGC法[5]将Isolate精子梯度液(美国Irvine)的下层液(浓度80%)加入15 mL至锥底离心管底部，再将同体积浓度为40%的上层液缓慢置于其上，上下层可见明显分界面，再沿壁缓慢加入1.5 mL已液化的精液，1 338 r/min离心15 min，弃除上下层梯度液和精浆，精子沉淀物用人输卵管受精液(HTF，Quinn′s Advantage?Fertilization media)1 092 r/min离心洗涤 2次，弃上层，补充HTF液至1 mL ......