张华，高伟忠(.遵义医学院附属医院消化内科，贵州遵义563003；.遵义市第一人民医院麻醉科，贵州 563000)

    缺血再灌注损伤(IR)是由JENNINGS于1960年首次提出，指组织、器官缺血后再灌注，不仅不能使组织器官功能恢复，反而因凋亡因子、炎症介质的释放及自由基的作用等多种因素加重其结构损伤和功能障碍。肝IR是一个多因素、多环节、多途径损伤的级联反应过程，而缺血预处理是抗IR的有效措施[1]。

    红景天主要活性成分为红景天苷，研究表明，红景天苷具有抗疲劳、抗缺氧、抗纤维化等药理作用[2-5]。但对肝IR的影响机制尚不完善。本实验拟建立大鼠肝缺血再灌注模型，分别采用TUNEL法检测肝细胞凋亡、免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达，探讨红景天苷对肝缺血再灌注肝细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料及动物 兔抗鼠Bcl-2多克隆抗体、兔抗鼠Bax多克隆抗体、总蛋白测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)；TUNEL试剂盒(德国ROCHE)；Olympus全自动生化分析仪；红景天苷粉剂(昆明同持生物技术公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 模型制作 将56只SD大鼠分为肝缺血再灌注组(IR 组，n=24)、红景天苷组(S组，n=24)及假手术组(C组，n=8)，参照Pringle法[6]建立模型。IR组及 S组按再灌注1、3、6 h分为3个亚组。IR组采用夹闭肝蒂全肝缺血30 min，再灌注的方法建立大鼠肝缺血再灌注模型；S组大鼠分别于夹闭前24、48、72 h腹腔注射红景天苷溶液，剂量40 mg/kg(8 g/L)；C组仅暴露肝蒂，不阻断肝脏血流。实验结束后腹主动脉取血，所取大鼠肝组织以4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，制作切片，部分肝组织-80℃冰箱保存。

    1.2.2 大鼠血清生化指标检测 生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性 ......