何惊春，凌 华，张 敏，王 越，吴国辉，卢戎戎，周全华△(.九龙坡区疾病预防控制中心，重庆400039；.重庆市疾病预防控制中心，重庆40004)

    男男性接触(MSM)者由于其多性伴、性伴更换频率高、不安全性行为等因素，成为人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的危险人群。1981年美国洛杉矶和纽约首次报道的获得性免疫缺乏综合征(AIDS)患者便是

    MSM[1]。西欧和北美的研究显示，MSM人群是HIV耐药发生的主要高危人群之一[2]。由于我国MSM人群具有安全套使用率低、多性伴和双性恋比例高等特点[3-4]，使我国MSM人群成为HIV向普通人群传播的桥梁。MSM

    人群中耐药株的流行情况可以从一定程度上反映新发

    HIV感染者中耐药株的传播情况。本研究对重庆市门诊调查新发现的148例感染者治疗前的血样进行基因型耐药研究，分析该人群耐药的流行情况。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2014年1月至2015年12月重庆市疾病预防控制中心性病门诊调查新发现、经流行病调查其传播途径为MSM、经AIDS确证实验室蛋白质印迹法(Western blotting)试验确证为HIV-1阳性的148例感染者。年龄 16～62岁，平均(28.65±8.34)岁。采集患者的外周血置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，立即混匀，于6 h内常规离心机抗凝血分离血浆，分装后-80℃冻存，用于耐药基因型检测。

    1.2 方法

    1.2.1 病毒基因组RNA提取 参照QIAGEN公司Viral RNA Extraction Kit操作。

    1.2.2 In-house方法扩增蛋白酶编码区及逆转录酶编码区 参照全国HIV耐药监测网络和检测技术制订的标准操作程序操作，用In-honse方法扩增HIV-1蛋白酶基因区(pol区)全序列与部分逆转录酶序列，引物均由TAKARA生物工程有限公司合成，引物见表1。第1轮聚合酶链反应(PCR)引物为MAW-26、RT-21，体系试剂使用TAKARA公司生产的PrimeScriptTMOne Step RTPCR Kit Ver.2(Dye Plus) ......