重庆市男男性接触者HIV-1感染者原发耐药性分析*
毒株,亚型,1资料与方法,2结果,3讨论
何惊春,凌 华,张 敏,王 越,吴国辉,卢戎戎,周全华△(.九龙坡区疾病预防控制中心,重庆400039;.重庆市疾病预防控制中心,重庆40004)男男性接触(MSM)者由于其多性伴、性伴更换频率高、不安全性行为等因素,成为人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的危险人群。1981年美国洛杉矶和纽约首次报道的获得性免疫缺乏综合征(AIDS)患者便是
MSM[1]。西欧和北美的研究显示,MSM人群是HIV耐药发生的主要高危人群之一[2]。由于我国MSM人群具有安全套使用率低、多性伴和双性恋比例高等特点[3-4],使我国MSM人群成为HIV向普通人群传播的桥梁。MSM
人群中耐药株的流行情况可以从一定程度上反映新发
HIV感染者中耐药株的传播情况。本研究对重庆市门诊调查新发现的148例感染者治疗前的血样进行基因型耐药研究,分析该人群耐药的流行情况。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2014年1月至2015年12月重庆市疾病预防控制中心性病门诊调查新发现、经流行病调查其传播途径为MSM、经AIDS确证实验室蛋白质印迹法(Western blotting)试验确证为HIV-1阳性的148例感染者。年龄 16~62岁,平均(28.65±8.34)岁。采集患者的外周血置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中,立即混匀,于6 h内常规离心机抗凝血分离血浆,分装后-80℃冻存,用于耐药基因型检测。
1.2 方法
1.2.1 病毒基因组RNA提取 参照QIAGEN公司Viral RNA Extraction Kit操作。
1.2.2 In-house方法扩增蛋白酶编码区及逆转录酶编码区 参照全国HIV耐药监测网络和检测技术制订的标准操作程序操作,用In-honse方法扩增HIV-1蛋白酶基因区(pol区)全序列与部分逆转录酶序列,引物均由TAKARA生物工程有限公司合成,引物见表1。第1轮聚合酶链反应(PCR)引物为MAW-26、RT-21,体系试剂使用TAKARA公司生产的PrimeScriptTMOne Step RTPCR Kit Ver.2(Dye Plus) ......
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