石安琪综述，江 涛审校(重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科，重庆400016)

    在我国，肺癌已成为癌症死亡的首要病因。肺癌是发病率和病死率最高的恶性肿瘤，其5年生存率仅为16%，明显低于如结肠癌、乳腺癌和前列腺癌等其他类型的肿瘤[1]。在过去的20年里，肺癌的治疗方法不断改进，但肺癌患者的5年生存率仍然只有6%～18%。若肺癌能被早期诊断，肺癌患者的5年生存率可大大提高，甚至可提高至67%[2]。因此，及时、准确地诊断肺癌对指导临床治疗极为重要。目前，液基细胞学及组织病理学检查是肺癌诊断的“金标准”[3-4]，但上述2种诊断方法均由病理科医生肉眼诊断，结果具有一定的主观性，存在一定的漏诊率。DNA倍体分析技术通过对细胞DNA水平定量，了解细胞倍体变化情况，辅助诊断恶性肿瘤。因其具有客观、方便、重复性强等优点，近年来愈发受到肿瘤研究者的重视。多项研究显示，DNA倍体分析对宫颈癌、食管癌、口腔黏膜癌等肿瘤的诊断具有重要意义[5-8]。本文拟对DNA倍体分析技术在肺部恶性肿瘤中的研究进展进行综述。

    1 细胞DNA倍体分析技术的原理

    DNA是细胞生长、分化、繁殖的基础。人正常细胞染色体的数目和形状相对稳定。随着细胞的生长繁殖，细胞核的DNA结构和水平也会发生改变。每一个体细胞具有46条染色体，可配成23对，称为二倍体。当细胞处于有丝分裂活动时可为四倍体。当细胞发生癌变时，基因发生丢失、重组、融合、扩增等变化，导致细胞DNA水平变化，为非整倍体细胞。因此，以正常细胞作为标准对照，测定被检测细胞DNA水平，发现异常DNA水平细胞，可有助于肿瘤早期诊断[9-10]。DNA倍体分析是使用吸收光谱分析测量染色情况，细胞核特异性染色，染色的深浅与DNA水平成比例。颜色深浅通过电脑图像处理转变为积分吸光度(IOD)，被测细胞IOD值与正常细胞IOD值的比值则为DNA指数(DI)。人体超过90%的细胞处于细胞周期中的静止期(G0期)，为二倍体，其DI为1；G1期是细胞周期中的第1个阶段，细胞尚未增殖，DI为1；S期为DNA复制期，DI为 1～2；G2期为有丝分裂前期，DNA 倍增，DI为 2；M 期为有丝分裂期，细胞分裂为2个子细胞，DNA水平又恢复到二倍体。应用细胞分析仪进行DNA测量，可反映细胞染色体的畸变。

    目前，DNA定量分析的方法主要有2种：一种是流式细胞术，采用流式细胞仪对悬液中快速直线运动的、荧光标记的大量单细胞进行快速、精确的定量分析[11]；另一种是静态图像分析术，通过对细胞DNA特异染色(如Feulgen染色、甲基绿-派洛宁染色、荧光染色等 ......