牛磺酸对胰岛素抵抗HepG2细胞氧化应激的保护作用及机制研究*
棕榈,1材料与方法,2结果,3讨论
曹志龙,李德龙,陈冰婷,苏比努尔·巴克,马晓丽△(1.武警兵团总队医院,新疆 乌鲁木齐 830063;2.新疆医科大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830011)
2型糖尿病等代谢性疾病是仅次于心、脑血管病和癌症的世界性重大疾病。胰岛素抵抗(IR)是导致2型糖尿病的主要病理基础[1]。目前,氧化应激的“二次打击”学说已占据IR研究的核心地位[2]。氧化应激能进一步加重IR,是2型糖尿病及其并发症产生的病理之一[3-4]。因此,探究IR和氧化应激作用机制,发现更高效的具有抗氧化、减轻IR的物质为2型糖尿病前期IR的预防提供一个崭新的方法和思路。目前,合理的营养干预是国内外公认的预防和控制糖尿病的重要举措[5]。牛磺酸又称为β-氨基乙磺酸,具有很强的抗氧化活性,可有效清除体内大部分氧自由基,具有抑制脂质过氧化反应、降低组织氧耗等诸多作用[6]。Keap1-Nrf2通路是目前研究氧化应激的热点[7]。本研究在HepG2细胞IR模型中给予不同质量浓度牛磺酸,通过检测细胞存活率、评估氧化应激指标,以及Keap1-Nrf2通路关键因子的mRNA表达水平的测定,分析了牛磺酸对IR-HepG2细胞的氧化损伤保护作用及可能机制,旨在为牛磺酸改善糖尿病IR提供理论依据。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1实验细胞 HepG2人肝癌细胞株来源于凯基生物,细胞培养条件为MEM 培养基、10%胎牛血清联合1%PS,以及37 ℃、5%二氧化碳(CO2)、饱和湿度。
1.1.2仪器与试剂 Smart Cell HF-90 CO2细胞培养箱(上海力康仪器有限公司)、TGL-16GB台式低速离心机(上海飞鸽仪器有限公司)、DNP-9272恒温箱(上海精宏实验设备有限公司)、DHG型恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)、Eclipse TS100-F荧光倒置显微镜(日本尼康公司)、xMarkTM酶标仪(Bio-Rad公司)、恒温水浴锅、K5500核酸蛋白定量仪(北京凯奥公司)、2500凝胶成像系统(上海天能公司)、实时定量聚合酶链反应(PCR)系统(美国ABI公司)、胎牛血清(FND500 ......
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