拉曼光谱技术在非侵入性优选卵裂期胚胎中的应用*
培养液,培养基,1资料与方法,2结果,3讨论
曹 芳,王宇峰,于春梅,夏西洋,高亭亭,戴秀亮(南京医科大学附属常州市妇幼保健院生殖中心,江苏 常州 213000)
胚胎发育潜能直接影响人类辅助生殖技术的临床结局。目前,主要以形态学评分评估胚胎质量,具有主观性,预测妊娠结局的价值有限,因此,探索能更客观地评价胚胎发育潜能,更准确地选择优质胚胎,从而提高临床妊娠率是胚胎学家需要攻克的难点。胚胎在其形态发生改变之前已发生了代谢产物的变化,而培养基是胚胎在体外的直接生存环境,培养基中代谢物质变化可能与胚胎质量有关。本研究探讨了利用拉曼光谱技术对培养基代谢物质分析是否与胚胎生殖潜力相关,从而寻找一种新的客观评价胚胎质量的方法。
1 资料与方法
1.1研究对象 收集2019年86例体外受精/卵细胞浆内单精子注射周期中第3天(D3)卵裂期胚胎培养液,其中D3优质卵裂胚形成优质囊胚27例,D3优质卵裂胚未形成囊胚29例,D3次级卵裂胚未形成囊胚30例。
1.2方法
1.2.1胚胎培养及分级 人绒毛膜促性腺激素日48 h后常规消毒取卵,在体外受精微滴中授精过夜,去除受精卵颗粒细胞后转移至G1培养液滴,记录第1天(D1)原核情况,D3将准备继续进行囊胚培养的卵裂胚转移至G2培养液滴。根据胚胎形态学评分标准对卵裂期胚胎进行分级,Ⅰ、Ⅱ级为优质卵裂胚;Ⅲ级为次级卵裂胚,Ⅳ级为废弃胚胎。用序贯培养法将卵裂期胚胎继续培养至第6天后根据卵裂胚继续培养是否形成囊胚,以及形成的囊胚根据评分标准分为优质囊胚(内细胞团及滋养细胞均为B级以上)和次级囊胚(内细胞团或滋养细胞为C级) ......
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