中药抗肝纤维化作用机理(1)
肝纤维化(hepaticfibrosis)是一切慢性肝病的病理学基础，是形成肝硬化的必经病理阶段 。近年来研究证实，中药防治肝纤维化具有独特优势，针对肝纤维化发生的各个环节进行抗 肝纤维化治疗取得很多进展，中药抗肝纤维化作用机理研究也呈现出多方向、多层次展开的 局面。现就近年来有关中药抗肝纤维化的作用机理综述如下。
1 消除炎症，减少细胞因子的释放
肝细胞损伤后，Kupffer细胞和淋巴细胞等炎性细胞被激活，释放多种细胞因子，促进间质 细胞的有丝分裂，使贮脂细胞及其他细胞合成胶原纤维增多。因此，消除炎症、减少细胞因 子的释放，是抑制胶原合成、抗肝纤维化的重要途径。近年来研究表明〔1-2〕，IL6 及IL8主要由单核细胞和巨噬细胞产生，与肝脏局部炎症反应有关，参与炎性损伤过程。在 中国人肝纤维化产生过程中，IL6、IL8水平升高。而IL10则具有抑制肝纤维化作用。朱金水 等〔3〕采用氧化苦参碱治疗肝纤维化患者3个月后，肝功能好转者IL6，IL8水平较治 疗前有显著降低，IL10水平升高，证实了氧化苦参碱可通过调节减少炎性细胞释放细胞因子 来改善肝纤维化预后。肝炎平〔4〕复方也能通过减少IL6、IL8、TNF岬认赴蜃拥产生，改善肝微循环，从而明显抑制肝纤维组织增生及假小叶形成，使组织胶原含量明显减 少，抑制肝纤维化形成。
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2 调节机体免疫功能，减少肝细胞的免疫损伤
肝硬化与免疫功能失调有关，但发病机理至今尚未明了。免疫调控可能在其中起到重要的作 用，这主要是由于肝脏供血丰富，是机体进行物质交换和代谢的中心，易与外来异物抗原接 触，从而激活细胞免疫系统而发生免疫反应，并进一步释放细胞因子，激活贮脂细胞而导致 胶原代谢紊乱，引起肝纤维化的发生〔5〕。姚真敏等〔6〕发现，鳖甲煎口服 液对体液免疫有调节作用，可减少肝细胞的免疫损伤，改善物质代谢，对肝组织有保护作用 。桑黄具有明显的抗肝纤维化作用，诱生干扰素，提高机体免疫功能可能是其作用机理之一 〔7〕。抗纤软肝冲剂通过调整肝纤维化大鼠机体免疫功能、降低血清免疫复合物而 保护肝细胞，抑制纤维化形成〔8〕。
3 抑制ECM的合成和促进ECM的降解
肝纤维化的形成主要是细胞外基质(ECM)的过度产生和沉积所致，ECM的沉积和降解失衡是肝 纤维化形成的本质，恢复二者的平衡是阻断或逆转肝纤维化的重要途径之一。陈颖伟等 〔8〕用四氯化碳皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型，分别给予大黄和粉防己碱(Tet)灌胃 。放免法测定ECM，大黄与Tet均可降低ECM含量，降低肝纤维化程度。沈洁云等〔9〕总结了丹参的抗肝纤维方〔10〕则能抑制纤维化肝脏细胞合成胶原，减少ECM沉积， 发挥抗肝纤维化作用。
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4 抑制HSC的活化和增殖，促进HSC的凋亡
肝脏星形细胞(HSC)的活化和增殖是多数ECM的细胞来源，HSC的激活是肝纤维化发生的中心 环节，抑制静止的HSC转变为活化的肌成纤维样细胞、促进HSC的凋亡是抗肝纤维化治疗的一 个重要途径。王要军等〔11〕研究表明，复方汉防己(汉防己、丹参、半枝莲、虎杖 、黄芪)抗肝纤维化的机理可能是抑制贮脂细胞的增殖。郭顺根等〔12〕研究表明活 血化瘀方药(丹参、生黄芪、枳壳、赤芍、川芎、红花)血清可通过抑制离体肝星形细胞增殖 而达到抗肝纤维化的作用。福尔肝6号〔13〕药物血清，均能显著抑制大鼠肝星状细 胞系HSCT6增殖，并使细胞周期阻滞于G1期，从而抑制HSC增殖。促进HSC凋亡在肝纤维化治 疗中也具有重要作用。研究发现复方861(丹参、黄芪、鸡血藤等)能显著增加体外培养的HSC 的凋亡率。电镜下均可见凋亡改变：内质网扩张，细胞核不规则，染色质浓缩并凝结成块， 核内异染质沿核膜内侧排列，偶有凋亡小体，其内可见染色质或细胞器；采用复方861治疗( 6个月)慢性乙型肝炎患者的前后2次肝穿刺结果，复方861治疗后可见肝细胞再生明显，TUNE L和酳MA，Masson三重染色可见尚存的部分HSC出现凋亡〔15-16〕。
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5 促进肝细胞再生
在肝纤维化形成过程中，肝细胞的相对体积和绝对数量都显著减少。因此，刺激、促进肝细 胞再生是治疗肝纤维化的重要途径之一。李万平等〔17〕发现肝毒清能减轻模型大鼠 肝脂肪变性、减少纤维组织增生、促进肝细胞再生。软肝冲剂亦能调节CCl4肝硬变过程中细 胞周期各时相DNA含量，促进肝细胞再生，抑制肝纤维化、肝硬变的形成〔18〕。喻 长远等〔19〕在电镜观察下发现，肝纤宁颗粒使肝纤维化模型大鼠肝细胞线粒体肿胀 少而轻，滑面内质网增生，扩张不明显，损伤性细胞结构少。提高肝细胞存活率，促使肝细 胞修复再生，是肝纤宁抗纤维化作用机理之一。
6 阻断转化生长因子信号转导途径
利用TGF 1及其受体拮抗剂治疗肝纤维化已取得一些进展。虫草多糖是虫草菌丝抗肝纤维化 的有效成分之一，方步武等〔20〕发现该药能明显抑制TGF 1与TGF釸1的异常表达 ，减少肝窦HSC的活化，从而抑制胶原的生成和沉积而抗肝纤维化。和络舒肝胶囊对大鼠慢 性肝损伤具有保护作用，其作用机制可能与影响TGF-- 1蛋白表达水平有关，而且可能是通 过抑制信号转导分子Smad3mRNA的转录水平来实现〔21〕。丹酚酸B盐(SAB)是丹参的 主要水溶性成分之一，SAB抑制TGF 1的HSC胞内信号转导，从而拮抗TGF 1的促HSC活化， 这些是SAB抗肝纤维化的主要机理〔22〕。
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7 调控基因表达水平
随着细胞生物学和分子生物学研究的进展，基因治疗为中药抗肝纤维化机理研究提供了新的 途径。赵钢等〔23〕从细胞分子水平研究发现，抗纤软肝冲剂促进MMP1，抑制TIMP1 基因表达，从而促进胶原降解，这可能是该方抗肝纤维化的细胞分子学机理之一。前述中药 复方“861”既能抑制MMP2的基因表达，但又因可能解除MMMP2的抑制因素而提高其活性，以 降解沉积的纤维性胶原而参与肝纤维化的逆转过程〔24〕。刘绍能等〔25〕用 人血白蛋白免疫致敏法建立大鼠肝纤维化模型，用芪术颗粒治疗3个月，取肝组织用原位杂 交方法检测EGF的表达信号，研究表明，芪术颗粒通过抑制EGF的基因表达，使胶原蛋白合成 减少，从而减轻肝纤维化的程度。
综上所述，中药抗肝纤维化的研究已进入细胞分子水平，少数已深入到细胞内信息控制水平 ，其作用机制为多环节、多途径。随着基因治疗、细胞因子生物学等研究的不断深入，中药 肝纤维化的作用机理研究也会进入到一个新水平。
8 参考文献
〔1〕李蕴铷，吕敏和.肝纤维化患者血清白介素8水平与Child分级的关系〔J〕. 胃肠病学和肝病学杂志，1998，7(4)：343, 百拇医药(钱勇)
1 消除炎症，减少细胞因子的释放
肝细胞损伤后，Kupffer细胞和淋巴细胞等炎性细胞被激活，释放多种细胞因子，促进间质 细胞的有丝分裂，使贮脂细胞及其他细胞合成胶原纤维增多。因此，消除炎症、减少细胞因 子的释放，是抑制胶原合成、抗肝纤维化的重要途径。近年来研究表明〔1-2〕，IL6 及IL8主要由单核细胞和巨噬细胞产生，与肝脏局部炎症反应有关，参与炎性损伤过程。在 中国人肝纤维化产生过程中，IL6、IL8水平升高。而IL10则具有抑制肝纤维化作用。朱金水 等〔3〕采用氧化苦参碱治疗肝纤维化患者3个月后，肝功能好转者IL6，IL8水平较治 疗前有显著降低，IL10水平升高，证实了氧化苦参碱可通过调节减少炎性细胞释放细胞因子 来改善肝纤维化预后。肝炎平〔4〕复方也能通过减少IL6、IL8、TNF岬认赴蜃拥产生，改善肝微循环，从而明显抑制肝纤维组织增生及假小叶形成，使组织胶原含量明显减 少，抑制肝纤维化形成。
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2 调节机体免疫功能，减少肝细胞的免疫损伤
肝硬化与免疫功能失调有关，但发病机理至今尚未明了。免疫调控可能在其中起到重要的作 用，这主要是由于肝脏供血丰富，是机体进行物质交换和代谢的中心，易与外来异物抗原接 触，从而激活细胞免疫系统而发生免疫反应，并进一步释放细胞因子，激活贮脂细胞而导致 胶原代谢紊乱，引起肝纤维化的发生〔5〕。姚真敏等〔6〕发现，鳖甲煎口服 液对体液免疫有调节作用，可减少肝细胞的免疫损伤，改善物质代谢，对肝组织有保护作用 。桑黄具有明显的抗肝纤维化作用，诱生干扰素，提高机体免疫功能可能是其作用机理之一 〔7〕。抗纤软肝冲剂通过调整肝纤维化大鼠机体免疫功能、降低血清免疫复合物而 保护肝细胞，抑制纤维化形成〔8〕。
3 抑制ECM的合成和促进ECM的降解
肝纤维化的形成主要是细胞外基质(ECM)的过度产生和沉积所致，ECM的沉积和降解失衡是肝 纤维化形成的本质，恢复二者的平衡是阻断或逆转肝纤维化的重要途径之一。陈颖伟等 〔8〕用四氯化碳皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型，分别给予大黄和粉防己碱(Tet)灌胃 。放免法测定ECM，大黄与Tet均可降低ECM含量，降低肝纤维化程度。沈洁云等〔9〕总结了丹参的抗肝纤维方〔10〕则能抑制纤维化肝脏细胞合成胶原，减少ECM沉积， 发挥抗肝纤维化作用。
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4 抑制HSC的活化和增殖，促进HSC的凋亡
肝脏星形细胞(HSC)的活化和增殖是多数ECM的细胞来源，HSC的激活是肝纤维化发生的中心 环节，抑制静止的HSC转变为活化的肌成纤维样细胞、促进HSC的凋亡是抗肝纤维化治疗的一 个重要途径。王要军等〔11〕研究表明，复方汉防己(汉防己、丹参、半枝莲、虎杖 、黄芪)抗肝纤维化的机理可能是抑制贮脂细胞的增殖。郭顺根等〔12〕研究表明活 血化瘀方药(丹参、生黄芪、枳壳、赤芍、川芎、红花)血清可通过抑制离体肝星形细胞增殖 而达到抗肝纤维化的作用。福尔肝6号〔13〕药物血清，均能显著抑制大鼠肝星状细 胞系HSCT6增殖，并使细胞周期阻滞于G1期，从而抑制HSC增殖。促进HSC凋亡在肝纤维化治 疗中也具有重要作用。研究发现复方861(丹参、黄芪、鸡血藤等)能显著增加体外培养的HSC 的凋亡率。电镜下均可见凋亡改变：内质网扩张，细胞核不规则，染色质浓缩并凝结成块， 核内异染质沿核膜内侧排列，偶有凋亡小体，其内可见染色质或细胞器；采用复方861治疗( 6个月)慢性乙型肝炎患者的前后2次肝穿刺结果，复方861治疗后可见肝细胞再生明显，TUNE L和酳MA，Masson三重染色可见尚存的部分HSC出现凋亡〔15-16〕。
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5 促进肝细胞再生
在肝纤维化形成过程中，肝细胞的相对体积和绝对数量都显著减少。因此，刺激、促进肝细 胞再生是治疗肝纤维化的重要途径之一。李万平等〔17〕发现肝毒清能减轻模型大鼠 肝脂肪变性、减少纤维组织增生、促进肝细胞再生。软肝冲剂亦能调节CCl4肝硬变过程中细 胞周期各时相DNA含量，促进肝细胞再生，抑制肝纤维化、肝硬变的形成〔18〕。喻 长远等〔19〕在电镜观察下发现，肝纤宁颗粒使肝纤维化模型大鼠肝细胞线粒体肿胀 少而轻，滑面内质网增生，扩张不明显，损伤性细胞结构少。提高肝细胞存活率，促使肝细 胞修复再生，是肝纤宁抗纤维化作用机理之一。
6 阻断转化生长因子信号转导途径
利用TGF 1及其受体拮抗剂治疗肝纤维化已取得一些进展。虫草多糖是虫草菌丝抗肝纤维化 的有效成分之一，方步武等〔20〕发现该药能明显抑制TGF 1与TGF釸1的异常表达 ，减少肝窦HSC的活化，从而抑制胶原的生成和沉积而抗肝纤维化。和络舒肝胶囊对大鼠慢 性肝损伤具有保护作用，其作用机制可能与影响TGF-- 1蛋白表达水平有关，而且可能是通 过抑制信号转导分子Smad3mRNA的转录水平来实现〔21〕。丹酚酸B盐(SAB)是丹参的 主要水溶性成分之一，SAB抑制TGF 1的HSC胞内信号转导，从而拮抗TGF 1的促HSC活化， 这些是SAB抗肝纤维化的主要机理〔22〕。
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7 调控基因表达水平
随着细胞生物学和分子生物学研究的进展，基因治疗为中药抗肝纤维化机理研究提供了新的 途径。赵钢等〔23〕从细胞分子水平研究发现，抗纤软肝冲剂促进MMP1，抑制TIMP1 基因表达，从而促进胶原降解，这可能是该方抗肝纤维化的细胞分子学机理之一。前述中药 复方“861”既能抑制MMP2的基因表达，但又因可能解除MMMP2的抑制因素而提高其活性，以 降解沉积的纤维性胶原而参与肝纤维化的逆转过程〔24〕。刘绍能等〔25〕用 人血白蛋白免疫致敏法建立大鼠肝纤维化模型，用芪术颗粒治疗3个月，取肝组织用原位杂 交方法检测EGF的表达信号，研究表明，芪术颗粒通过抑制EGF的基因表达，使胶原蛋白合成 减少，从而减轻肝纤维化的程度。
综上所述，中药抗肝纤维化的研究已进入细胞分子水平，少数已深入到细胞内信息控制水平 ，其作用机制为多环节、多途径。随着基因治疗、细胞因子生物学等研究的不断深入，中药 肝纤维化的作用机理研究也会进入到一个新水平。
8 参考文献
〔1〕李蕴铷，吕敏和.肝纤维化患者血清白介素8水平与Child分级的关系〔J〕. 胃肠病学和肝病学杂志，1998，7(4)：343, 百拇医药(钱勇)