左泽红 叶志伟 简锦辉 万 华 林俊芳 郭丽琼* 云 帆

    (1 华南农业大学食品学院 广州510642 2 华南农业大学数信学院 广州510642 3 广东省微生态制剂工程技术研究中心 广州510642 4 广州市澳键丰泽生物科技股份有限公司 广州510530)

    蛹虫草是一种珍贵的药用真菌，富含多种生物活性物质，如虫草多糖、虫草酸、虫草素和腺苷等[1]，具有抗癌、抗肿瘤、抗炎症、免疫调节、抗氧化和抑菌等多种药理作用[2]。研究表明，蛹虫草呈黄色或橙黄色是因为体内类胡萝卜素的积累[3]。类胡萝卜素是由类异戊二烯单位组成的碳氢化合物及其氧化衍生物的总称，同样具有抗炎、抗癌以及抗氧化等功效[4]。现今发现的类胡萝卜素绝大部分是脂溶性类胡萝卜素，人体难以直接吸收利用且大部分遇光和热不稳定[5-6]。蛹虫草中的类胡萝卜素有叶黄素[7]、玉米黄素[8]和北虫草黄素[9]，前2 者属于脂溶性类胡萝卜素，而后者具有很强的亲水性，并且其含量占蛹虫草中总类胡萝卜素含量的86.7%。与传统类胡萝卜素相比，其理论上具有更强的生理活性，能更好地被人体吸收并且生物利用度更高。固体发酵技术具有成本低，易于管理，后处理设备少等优点，是一种经济、环保、有效的生产方式[10]，广泛应用于各种生物活性成分的生产，然而，通过固体发酵技术生产类胡萝卜素的方式还未曾报道。本研究采用固体发酵技术，通过筛选出的蛹虫草菌株建立了一套蛹虫草高产类胡萝卜素固体发酵体系，为今后开发利用蛹虫草中水溶性类胡萝卜素提供科学数据。

    1 试验材料

    1.1 试验菌株

    蛹虫草菌种CM04，保藏于广东省微生物制剂工程技术研究中心；CM09，购自北京吉蕈园科技有限公司；CM10，购自宁阳县海鑫生物科技有限公司。

    1.2 试验试剂

    琼脂、葡萄糖、磷酸二氢钾、蛋白胨、硫酸镁、无水乙醇，购自广州成硕生物工程有限公司。

    1.3 仪器与设备

    2 试验方法

    2.1 蛹虫草培养方法

    1)活化 将斜面或-80 ℃保存的原始菌株接种到PDA 固体平板培养基上，25 ℃恒温遮光培养至菌丝长满培养皿，然后光照使其转色，得到活化的菌种。

    2)种子液的制备 在活化好长满黄色菌丝的平板上，取3～4 块黄豆粒大小的菌丝块接种于PDA 液体培养基中，在25 ℃、150 r/min 条件下振荡培养4～5 d，待长满菌丝球后可用于接种。

    3)固体发酵 在组培瓶中加入按培养基配方准确称取的各类谷物 ......