微颗粒对黑曲霉产阿魏酸酯酶酶活的影响
滑石粉,1材料与方法,1菌株和培养基配方,2主要材料与试剂,3主要仪器与设备,4发酵培养及酶液制备,5酶活测定,6蛋白质质量浓度的测定,7生物量的测定,8显微镜观察及粒度分布,2结果与分析,1微颗粒对黑曲霉发酵产阿魏酸酯酶
娄行行,魏天予,芦红云,陈启和(浙江大学食品科学与营养系 杭州310058)
阿魏酸酯酶(Ferulic acid esterases,FAEs)是一种能水解阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯和多糖阿魏酸酯中的酯键,使阿魏酸游离出来的羧酸酯酶[1],在食品和饲料等工业中有着光明的前景。食品工业利用阿魏酸酯酶降解植物细胞壁中阿魏酸酯键,得到有药用价值和保健功能的游离阿魏酸。通过阿魏酸酯酶的处理,饲料工业中植物性原材料的细胞壁变的疏松,更容易被禽畜消化利用。研究表明,真菌和细菌都能分泌阿魏酸酯酶[2-3],然而目前研究较多的是真菌中的黑曲霉。
黑曲霉在工业中有广泛的应用,如在柠檬酸生产以及各种高价值酶产品包括果胶酶、蛋白酶、淀粉葡糖苷酶、纤维素酶、半纤维素酶和脂肪酶[4-5]等的生产。虽然曲霉菌是一种重要的工业微生物,但这些丝状微生物中有一个难以控制的特性就是它复杂的形态,它们不仅有致密的小球还有黏性的菌丝[6]。由于以分散菌丝形态存在的真菌可以带来更高的产品收益率,因此其价值一般优于菌丝形成小球形态的真菌[7-8]。合适的菌株形态对发酵的重大作用促使研究者尝试改变真菌的生长特性,相关研究包括一些培养参数的改变,如接种量、转速、培养基配料以及酸碱度[9-12]。已有研究通过对具有合适形态突变体的随机筛选得到了较理想的菌团形态,并改善了半纤维素酶的产量[13]。因而,改善真菌形态已经成为生物技术的一个研究热点。最近发现通过向培养基中添加滑石粉和氧化铝可以控制真菌的形态,其对黑曲霉和其它丝状微生物的形态发展具有强烈的影响[14]。本文通过向黑曲霉ZJUQH 液体深层发酵培养基中添加不同质量浓度的滑石粉、氧化铝和高岭土,探究添加微颗粒对黑曲霉菌丝生长和产阿魏酸酯酶酶活的影响。
1 材料与方法
1.1 菌株和培养基配方
1)菌株 黑曲霉ZJUQH,由本实验室保藏。
2)斜面培养基 20%马铃薯煮出液,1%葡萄糖。
3)基础发酵培养基(质量分数) 22.6%豆粕浸出液、1.035%蛋白胨、0.3% KH2PO4、0.8%Na2HPO4·7H2O、0.01%NaC1、0.02% MgSO4·7H2O、0.005% CaC12,自然pH 值。
1.2 主要材料与试剂
滑石粉颗粒(800 目),上海麦克林生化科技有限公司;三氧化二铝颗粒(200~300 目)、高岭土颗粒(300 目),上海阿拉丁生化科技股份有限公司;马铃薯,购于超市;豆粕、蛋白胨 ......
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