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编号:39458
新型水解蛋清蛋白短肽对大鼠结肠炎症的保护作用
http://www.100md.com 2021年9月9日 2021年第8期
1材料与方法,1实验动物,2材料与试剂,3仪器与设备,4水解蛋清蛋白肽的制备,5试验方法,2结果与分析,1HEpep分子质量分布,2HEpep的氨基酸含量检测结果,3HEpep对大鼠结肠组织病理学变化的影响,4HE
     魏秋红,高 欢,刘晓月,翟婧卉,宋燕青

    (吉林大学第一医院药学部 长春 130000)

    炎症性肠病 (Inflammatory bowel disease,IBD)主要病变部位是结肠黏膜和黏膜下层,临床表现为腹痛、腹泻及血便等[1]。相关研究表明,炎症因子、活性氧以及外源性有害物质均能够导致机体自发免疫通路活化,直接或间接调控炎症通路的激活和炎症因子的释放,最终导致肠黏膜病理性损伤[2]。

    通过不同酶解方法可获得具有抗炎、抗病毒、抗高血压和抗肿瘤等功能的蛋清蛋白活性肽,在营养食品和药物研发方面具有重要的意义[3-4]。本研究用水解蛋清蛋白短肽(HEpep)是以蛋清蛋白为原料,通过酶解方法获得平均分子质量为1 300 u 的短肽,拟建立LPS 所致大鼠结肠炎症模型,通过免疫组化染色、生化试剂盒检测等多种技术手段观察HEpep 对大鼠结肠炎是否具有缓解作用,分析其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF 级雄性SD 大鼠60 只(200~220 g),由吉林大学实验动物中心提供,动物合格证号:0191551。所有大鼠饲养于吉林大学实验动物中心,保证光照/黑暗时间各12 h 循环交替;保证大鼠正常饮食和饮水;实验动物使用许可证号:SYXK(吉)2018-0001。

    1.2 材料与试剂

    超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)检测试剂盒、过氧化氢酶(Catalase,CAT)检测试剂盒,碧云天生物科技有限公司。肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)试剂盒,联科生物科技有限公司;TUNEL 试剂盒,罗氏生物科技公司;DAB 显色试剂盒(20×)、KIT-9921 即用型免疫组化试剂盒(鼠/兔),福州迈新试剂生物技术开发有限公司;其它试剂均为国产分析纯级。

    1.3 仪器与设备

    分析天平 (精度0.001 g),日本岛津公司;BX53 生物光学显微镜,Olympus 公司;高速低温离心机,BIO-RAD 公司;7600-210 酶标仪,HITACHI 公司;RM2235 石蜡切片机,Leica 公司;1525 高效液相色谱仪、2487 紫外检测器,Waters公司。

    1.4 水解蛋清蛋白肽的制备 ......

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