李 耘，孙秀兰，王加生*

    (1 江南大学食品学院 江苏无锡 214122 2 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 北京 100081 3 江南大学食品科学与技术国家重点实验室 江苏无锡 214122)

    肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是威胁全球公众健康最严重的恶性肿瘤之一，每年大约60 万人死于HCC[1-2]。在我国，HCC 死亡率高达14.56%[3-4]。HCC 前兆首先是肝损伤、肝炎症以及肝功能异常(Abnormal liver function，ALF)等，其诱因也非常复杂。根据流行病学调查证实乙型肝炎感染、吸烟与嗜酒等不良习惯以及通过膳食途径摄入多种真菌毒素等是主要原因，其中通过膳食途径摄入多种真菌毒素诱发联合风险(协同效应)常常被忽略[5]，经口摄入黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)污染的食品以及微囊藻毒素LR(Microcystin LR，MC-LR)污染的饮用水及水产品尤为突出[6]。

    尽管有研究证实AFB1+MC-LR 之间存在肝毒性协同效应[7]，然而相关报道还非常缺乏。本研究基于雄性野生型C57BL/6 小鼠，采用CI 模型模拟结合合理外推，预测低剂量、亚慢性下AFB1+MC-LR 诱发小鼠肝癌的联合风险，同时结合5 项典型生化靶标，评价AFB1+MC-LR 诱发早期肝损伤联合效应及其差异性，阐述膳食暴露场景下AFB1+MC-LR 诱导联合肝毒性趋势及阈值空间，结果对合理制修订残留限量标准及风险管控等提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器

    小鼠碱性磷酸酶(AKP)试剂盒、谷丙转氨酶(ALT/GPT)试剂盒、谷草转氨酶(AST/GOT)试剂盒、小鼠甲胎蛋白(AFP)试剂盒，南京建成生物工程研究所；总胆红素(TBIL)试剂盒，上海润裕生物科技有限公司。

    灌胃针(6202)，日本Fuchigami 公司；ES-J 电子天平(精度0.1 mg)，天津D&T 传感技术有限公司；D1008/D1008E 台式离心机，美国Scilogex 公司；Infinite 200 M/F Pro 酶标仪，瑞士TECAN 公司。

    1.2 实验动物

    由于雄性鼠较雌性鼠对肝毒性表达更为敏感[8-9]，本研究以3 周龄野生型雄性C57BL/6 小鼠为研究载体。体重差异不超过20%，重量为(17.5±3.5)g，每次给药后1～3 h，进行整笼观察并记录临床症状。C57BL/6 小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司 ......