川明参粗多糖初级结构解析及其体外抗氧化活性
糖苷键,单糖,清除率,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1单糖组成及分子质量分析,2川明参粗多糖中糖肽键的连接方式,3官能团分析,4糖残基及连接情况分析,5川明参粗多糖的体外抗氧化活性
高 涛,唐华丽,罗振宇,罗黄洋,李 敏(重庆三峡学院生物与食品工程学院 重庆 404100)
植物多糖作为一类大分子化合物,具有抗肿瘤[1]、抗病毒[2]、抗氧化[3]、降血糖[4]、增强免疫等生物活性[5]。川明参(Chuanminshen violaceum Sheh et Shan)属伞形科多年生草本植物,主要分布在四川和湖北。作为传统中药,川明参具有止咳化痰、滋阴养胃、健脾的功效[6-7]。据报道,川明参多糖对遗传物质损伤也具有一定的修复作用[8];能显著提高超氧化物歧化酶 (Cu/Zn-SOD,Mn-SOD,Fe-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和硫氧还蛋白(Trx)的mRNA 表达水平[9];通过促进淋巴细胞增殖显著提高环磷酰胺诱导的小鼠的免疫活性,以及作为佐剂提高口蹄疫病毒疫苗免疫应答[10-11]。硫酸化川明参多糖不仅具有治疗自身免疫性疾病和免疫抑制类疾病的潜力,还具有抗鸭肠炎病毒的活性[11-12]。此外,硒化川明参多糖作为佐剂能增强乙肝疫苗的免疫应答[13]。
自由基是指含有未配对电子的基团、分子或原子,其包括超氧阴离子(O2-)、羟自由基(·OH)、脂质过氧化物(LPO)等,它是人体内正常代谢的产物。一般情况下,人体内的自由基水平处于动态平衡中,平衡一旦被打破,由于其状态极不稳定,其会攻击邻近分子(碳水化合物、蛋白质、脂质等)以夺取电子。过多的自由基会导致细胞结构破坏、功能丧失,造成细胞损伤或死亡[14-16]。
本研究通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生结合超高效液相色谱-质谱连用(UPLC-MS/MS)分析川明参粗多糖的单糖组成;采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其分子质量分布;通过紫外-可见光光谱(UV)、傅里叶红外光谱(FT-IR)以及核磁共振光谱(NMR)鉴定川明参粗多糖结构;通过羟自由基清除率、Fe2+螯合能力以及还原力试验研究川明参粗多糖的体外抗氧化能力,为进一步开发川明参多糖提供一定依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
干制川明参购自重庆市万州区中药材批发市场,经中药粉碎机粉碎。
葡萄糖(Glc),甘露糖(Man),半乳糖(Gal),核糖(Rib),岩藻糖(Fuc),木糖(Xyl),鼠李糖(Rha),阿拉伯糖(Ara),古洛糖醛酸(Gudo),葡萄糖醛酸(GlcA),甘露糖醛酸(ManA),半乳糖醛酸(GalA),氨基半乳糖(GalN),氨基葡萄糖GlcN) ......
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