绣球菌子实体单组分多糖结构表征及其免疫活性
细胞因子,引物,1材料与方法,1试验材料,2主要试剂,3主要设备与仪器,4试验方法,5统计分析,2结果与分析,1SlP均一性和相对分子质量,2单糖组成,3红外光谱分析,4核磁共振波谱分析,5SCP-1三螺旋结构分析
郝正祺,刘靖宇,2,孟俊龙,2,常明昌,2,冯翠萍*(1 山西农业大学食品科学与工程学院 山西太谷 030801 2 山西省食用菌工程技术研究中心 山西太谷 030801)
多糖是一类由糖苷键聚合形成的生物大分子,主要来源于动植物及微生物,在生物体中发挥着信号传导、免疫调控和物质运输等作用[1]。真菌多糖具有广泛的生物活性,特别是在免疫调节方面,常被作为免疫调节剂和抗癌药物应用于临床治疗中[2]。有研究表明,真菌多糖的生物活性与其分子质量、分支程度、三螺旋结构、单糖组成和糖苷键类型有关,如高分子质量多糖比低分子质量多糖具有明显的抗肿瘤和抗氧化功效;巨噬细胞分泌NO 能力受多糖化学组成和糖苷键类型的影响等[3-5]。
巨噬细胞是连接机体非特异性免疫和获得性免疫之间重要的桥梁,它不仅吞噬并消化细胞残片和病原体,还可以激活淋巴球或其它免疫细胞,令其对病原体作出反应,在宿主的免疫应答过程中发挥着重要作用[6-7]。巨噬细胞常被作为评价活性多糖免疫调节特性的理想细胞模型。
绣球菌(Sparassis latifolia),又名绣球菇、绣球蕈,是一种珍稀名贵的食药用真菌,具有丰富的矿物质、氨基酸、维生素等营养成分,β-葡聚糖含量高达39.9%~43.6%[8-10]。绣球菌β-葡聚糖以带有1,6 分支的β-(1,3)-D-葡聚糖为主,分支频率约为3 个主链单位1 个分支,还有少量的β-(1,6)-D-葡聚糖和ɑ 型葡聚糖,具有多种生理及药理学功效[11],可抑制肿瘤诱导的血管生成及黑色瘤细胞的代谢,刺激外周血单核细胞及小鼠脾细胞产生细胞因子,提高动物的造血功能,同时绣球菌多糖还可提高炎症相关因子IL-12,IL-1β 等基因的表达量,促使树突状细胞的成熟[12-14]。目前对绣球菌多糖纯化后均一多糖组分的结构、免疫活性及其构效关系研究较少。本研究组采用聚能超声波辅助水提醇沉法提取绣球菌多糖,分离纯化后测定其分子质量、单糖组成、结构、表观形貌等,研究其免疫活性,探究其均一多糖组分结构表征与免疫活性之间的关系,为绣球菌多糖功能食品原料的开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
绣球菌子实体,由山西省太和食用菌栽培基地提供。
1.2 主要试剂
核糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、果糖等单糖标准品,DPPH、Tris、邻苯三酚,美国Sigma 公司;大孔树脂HZ-830、DEAE-52 纤维素粉末、Sephadex-G200 粉末、透析袋(8 000~14 000 u)、T-右旋糖酐(T-10 ......
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