刘晓丽，杨冰鑫，陈柳青，范宇婷，吴克刚，于泓鹏

    (广东工业大学轻工化工学院 广州 510006)

    肝脏通过吞噬和解毒功能对机体起保护作用[1]，而酒精是导致肝病的重要因素[2]。据世界卫生组织统计，全世界饮酒者高达23 亿，其中3.3%的饮酒者患有酒精性肝病 (Alcoholic liver disease，ALD)[3]。酒精性肝损伤的标志是乙醇诱导肝细胞的凋亡和坏死[4]，然而其发病机制尚不明确[5]。

    余甘子(Phyllanthus emblicaL.，PE)是叶下珠属木本植物的成熟果实，药食同源的品种之一。在传统的中药和印度医学中，余甘子干果被用作治疗肝损伤[6]。Pramyothin 等[7]报道余甘子能够提高肝细胞中AST、ALT 和IL-β 水平，从而抑制肝损伤。Reddy 等[8]认为余甘子中的多酚成分起护肝作用。余甘子多酚(Polyphenols fromPhyllanthus emblicaL.，PPE)属于天然的植物多酚，它可以诱导HO-1基因的表达，然而，目前PE 对酒精性肝损伤的保护作用机制及主要活性成分均未明确。

    本文研究PPE 及PE 中主要成分没食子酸(GA)、柯里拉京(CO)和鞣花酸(EA)对酒精性肝损伤的保护作用，探讨余甘子保肝作用的主要活性成分及作用机制，为余甘子在酒精性肝损伤治疗方面的应用提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    余甘子鲜果，凉山；BRL-3A 鼠肝细胞株，中国科学院上海细胞库；DMEM 培养基、胎牛血清(FBS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷胱甘肽(GSH) 试剂，南京建成生物研究所；没食子酸(GA)、柯里拉京(CO)、鞣花酸(EA)标准品，成都指标化所；逆转录试剂盒，德国DBI Bioscience 公司；荧光定量PCR 检测试剂盒，美国GeneCopoeia公司；Bicinchoninic acid(BCA)蛋白定量试剂盒，杭州弗德生物。

    1.2 仪器与设备

    7500 荧光定量PCR 仪，德国DBI Bioscience公司；SMA4000 微量核酸定量仪，美国Merinton公司；多功能酶标仪，上海现科仪器有限公司；LC-20A 高效液相色谱仪、Inertsil ODS C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)色谱柱，日本岛津公司；脱色摇床、电泳仪，北京六一仪器厂；灰度分析软件Image J ......