商迎辉，李梦洁，刘芸如，黄汉昌，劳凤学

    (北京联合大学功能因子与脑科学研究院 生物化学工程学院 北京 100191)

    益生菌是对人体有益的活性菌群，能增强人体的免疫力[1]，促进肠道的健康，预防和改善腹泄等状况[2]。其中，双歧杆菌不但可产生B1、B2、B6、B12等多种维生素及氨基酸，还可产生有机酸，使有害菌或一些致病菌因肠内pH 值的下降而死亡。另外，益生菌必须满足可食用性、安全性和稳定性。经过再加工生产后仍然稳定且具有活性，可以耐受胃酸、胆汁和胰酶的消化，可在体内繁殖[3]。

    益生菌每日的摄入量决定其益生效果，到达肠道内的益生菌数为106CFU/g(mL)时才能对人体产生益生效果[4]。益生菌类保健食品应含有与其益生作用相对应的菌种和最低的含量值。《益生菌类保健食品申报与审评规定(试行)》中规定益生菌类保健食品在其保质期内的活菌数量的最小值为106CFU/g(mL)。

    不确定度是表征合理地赋予被测量值的分散性与测量结果相联系的参数[5]。《检测和校准实验室能力的通用要求》[6]和《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明》[7]中明确要求：微生物检测实验室应具有对测量不确定度评定的相应能力。

    不确定度的评定一般用A 类评定和B 类评定来评定测量不确定度分量。其中，A 类评定用统计方法评定不确定度分量，重复性检测引入的不确定度属于A 类不确定度；而另一类B 类评定用任何非统计方法评定不确定度分量，仪器和设备校准引入等的不确定度属于B 类不确定度[8]。

    同时含有乳杆菌和双歧杆菌的益生菌类保健食品中双歧杆菌的计数是按照《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》(GB 4789.35-2016)[9]进行，其中，样品稀释和加样时既可以使用1 mL 吸管也可以使用微量移液器。其操作方便，耗材成本较低，在实验室检验过程中微量移液器的使用更普遍。益生菌类保健食品中双歧杆菌的数量较大，稀释倍数大，由于与微量移液器相比吸量管的允差小，因此带入的不确定度变小。本研究目的是比较以上两种量具对双歧杆菌计数的测量不确定度产生的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    市售益生菌类保健品(同时含乳杆菌属和双歧杆菌属)，汤臣倍健股份有限公司；莫匹罗星锂盐、半胱氨酸盐酸盐改良的MRS 培养基，北京陆桥技术有限责任公司。

    1.2 仪器与设备

    1.2.1 引入B 类不确定度的仪器与设备 依据《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》(GB 4789.35-2016) ......